Занятие ТЕМА: «Микробиологическая диагностика пищевых интоксикаций»

ТЕМА: «Микробиологическая диагностика пищевых интоксикаций»

I План занятия

1. Закрепить знания о морфологии, культуральных и биохимических свойствах патогенных стафилококков, клостридий, перфрингенс и клостридий ботулизма.

2. Изучить механизм патогенеза пищевых интоксикаций.

3. Изучить правила забора исследуемого материала при подозрении на ботулизм.

4. Изучить методику микробиологической диагностики ботулизма.

5. Закрепить знания и практические навыки по проведению микробиологической диагностики пищевых интоксикаций, вызванных St.aureus и Cl. рerfringens.

IIПрактическая работа

Задание 1.

Изучите путем микроскопии музейных препаратов и по таблицам морфологические свойства возбудителей пищевых интоксикаций, зарисуйте мазки в дневник и подпишите.

Задание 2.

I Приготовьте питательные среды, используемые для выделения и идентификации возбудителей пищевых интоксикаций:

1. ЖСА, расплавив стерильный СА во флаконе на водяной бане; охладите до 45-50⁰С и добавьте 20% желточной взвеси, соблюдая стерильность, и разлейте в стерильные чашки Петри.

2. Среду Гисса с маннитом по прописи на этикетке в объеме 50 мл и разлейте в пробирки столбиком, высотой 2,5-3 см.

II Изучите способ приготовления среды Китта-Тароцци.

Способ приготовления:

Говяжью печень нарезают кусочками по 1-1,5г, прибавляют по весу тройное количество СПБ, кипятят 30 мин; бульон отфильтровывают, кусочки печени промывают под краном на сите. Бульон разливают по 7-10 мл в пробирки, в каждую пробирку кладут по 4-5 кусочков печени. Бульон сверху заливают вазелиновым маслом слоем 1 см. Стерилизуют в автоклаве при давлении 0,5 атм 30 мин. Перед посевом пробирки кипятят на водяной бане 20 мин для удаления растворенного О₂, быстро остужают до 45⁰С (под струей водопроводной воды) и засевают.

Задание 3.

Проведите первичные посевы исследуемого материала (промывные воды желудка) с целью выделения возбудителей пищевых интоксикаций.

Алгоритм первичных посевов при выделении

возбудителей пищевых интоксикаций.

1. С целью выделения клостридий ботулизма и клостридий перфрингенс 1мл исследуемого материала пипеткой засевают в среду Китта-Тароцци → 37⁰С 24 часа.

2. С целью выделения патогенного стафилококка делают посев исследуемого материала шпателем на среду ЖСА → 37⁰С 48 час.

Примечание: Выделение чистых культур и окончательную идентификацию данных возбудителей проводят по общепринятым схемам.

Задание 4.

Изучите методику постановки биопробы и реакции нейтрализации ботулинистического токсина при подозрении на ботулизм по схеме и сделайте заключение.

Схема

постановки биопробы и реакции нейтрализации

ботулинистического токсина

Заключение:

Задание 5.

Изучите средства специфической профилактики и терапии ботулизма, запишите их название в дневник.

Задание 6.

Проведите постановку тестов межвидовой идентификации бактерий рода Staphylococcus, учтите результаты и сделайте заключение:

1. Сделайте посев чистой культуры стафилококка на сектор чашки Петри с ЖСА → 37⁰С 24 часа

Результат:

Заключение:

2. Поставьте РКП с чистой культурой стафилококка и плазмой крови кролика, разведенной 1:5.

Результат:

Заключение:

3. Сделайте посев чистой культуры стафилококка в столбик среды Гисса с маннитом, залейте слоем вазелинового масла (1см) и инкубируйте при 37⁰С 5 суток.

Укажите, как выполняется данный посев:

Результат:

Заключение:

Общий вывод: «Выделен …..

Задание 7

1. Сделайте мазок из чистой культуры, выделенной на среде Китта-Тароцци, окрасьте по методу Грама-Синева, зарисуйте в дневник и сформулируйте заключение.

Заключение:

2. Наметьте ход дальнейшего бактериологического исследования для окончательной идентификации данной культуры.

Оценка ___________

Подпись преподавателя ______________