Лекция Тема: «Возбудители бруцеллеза, сибирской язвы»

Лекция

Тема: «Возбудители бруцеллеза, сибирской язвы»

План

1. Возбудители бруцеллеза, ихморфология, культуральные и биохимические свойства, токсинообразование и антигенная структура. Виды бруцелл и тесты для их дифференциации. Иммунитет и профилактика бруцеллеза.

2. Бациллы сибирской язвы: таксономия, морфология и

биология, эпидемиология, патогенез,

Механизм заражения, клинические разновидности.

Иммунитет. Профилактика сибирской язвы.

БРУЦЕЛЛЫ

НДД:

Постановление МЗ РБ МСХП РБ №154/37 от 31 декабря 2002 г. Об утверждении и введении в действие Санитарных и Ветеринарных правил «Состояние здоровья населения в связи с влиянием микробиологического фактора среды обитания человека. Бруцеллез».

Таксономия.

Бруцеллы - это микроорганизмы, вызывающие бруцеллез человека и животных. По современной классификации Объединенного Комитета экспертов ФАО/ВОЗ по бруцеллезу род Brucella состоит из 6 видов, которые подразделяются на ряд биоваров (17). Название рода связано с именем Д.Брюса, открывшего в 1886 году возбудителя бруцеллеза.

Род Brucella относится к отделу Gracilicutes и не имеет определенного таксономического положения; он включает следующие 6 видов бруцелл:

-Br.melitensis - вид, являющийся возбудителем бруцеллеза мелкого рогатого скота (овец и коз); он включает 3 серовара (1,2,3); этот вид является наиболее вирулентным для человека, нередко вызывает эпидемические вспышки заболеваний, протекающих в тяжелой форме;

-Br.abortus - бычий вид, который вызывает бруцеллез крупного рогатого скота и объединяет 9 биоваров (1,2,3,4,5,6,7,8,9); у людей вызывает, как правило, спорадические случаи клинически выраженных заболеваний;

-Br.suis - возбудитель бруцеллеза свиней, этот вид объединяет 5 биоваров (1,2,3,4,5) и у людей вызывает спорадические случаи клинически выраженных заболеваний;

-Br.ovis - овечий вид, вызывающий эпидидимит у баранов и аборты у овец;

-Br.neotomae - вид, вызывающий бруцеллез у лесных крыс;

-Br.canis - вид, вызывающий бруцеллез гончих собак.

Что касается Br.ovis, Br.neotomae, Br.canis, то известны лишь единичные случаи заболевания, вызванные Br.canis.

Т.о. основными возбудителями бруцеллеза у человека являются Br.suis, Br.abortus, Br.melitensis.

Морфология.

Бруцеллы - мелкие грамотрицательные палочки овоидной, кокковидной формы длиной 0,6-0,15 мкм, шириной 0,5-0,7 мкм (коккобактерии), нередко обнаруживаются L-формы бруцелл. Не образуют спор, не имеют жгутиков, образуют нежную капсулу, в мазках располагаются беспорядочно.

При элективной окраске препаратов по Козловскому бруцеллы сохраняют красную окраску сафранина, в то время как остальные бактерии окрашиваются в зеленый цвет.

Культуральные свойства.

Бруцеллы - облигатные аэробы! Br.abortus для роста нуждается в присутствии 5-10 % углекислого газа (в первых генерациях).Optim.t˚С,а рН 6,8-7,2.

Бруцеллы требовательны к питательным средам и растут на специальных средах. Для культивирования бруцелл используют сывороточно-декстрозный агар, агар на картофельном настое с сывороткой, питательный агар с дрожжевым автолизатом (агар «Д»), печеночный агар и бульон, кровяной агар, эритрит агар, полусинтетическую среду «Альбими». Хорошей биологической средой для бруцелл являются также жировые яйца и куриные эмбрионы (в желточном мешке).

Бруцеллы растут в первых генерациях очень медленно, 2-3 недели, но не раньше 7-10 дней, в то время как лабораторные культуры бруцелл вырастают уже через 24-48 часа.

Колонии бруцелл на агаре - выпуклые, круглые, правильно контурированные, бесцветные с перламутровым оттенком, гомогенные или с нежной зернистостью, от 0,5-0.1 мм до 3-4 мм в диаметре, т.е. типичные S-формы колоний. Наряду с S-формами существуют и R-формы колоний, а иногда и L-формы.

На скошенных элективных средах бруцеллы образуют нежный, блестящий, прозрачный налет.

На жидких элективных средах бруцеллы образуют помутнение и небольшой осадок; пленка не образуется и только в старых культурах иногда отмечается кольцевидный рост по периферии стекла, слегка приподнимающийся над уровнем жидкости.

Ферментативные свойства.

Бруцеллы не разжижают желатин, не свертывают молоко, не образуют индол.

Br.melitensis-не образует сероволород, а Br.abortus(Br.ovis) и Br.suis образуют сероводород. Бруцеллы проявляют различное отношение к углеводам и бактериостатическому действию красок(1:25000):

Br.melitensis ферментирует только глюкозу, не чувствителен к фуксину и тионину, т.е. растет на средах с фуксином и тионином.

Br.abortus ферментируетглюкозу, инозит, рамнозу и маннозу, чувствителен к тионину, устойчив к фуксину (т.е. растет).

Br.suis ферментируетглюкозу, мальтозу, маннозу и трегалозу, чувствителен к фуксину, устойчив к тионину (т. е растет).

Все три вида бруцелл обладают оксидазной активностью(отличие от энтеробактерий), бруцеллы способны выделять каталазу.

Антигены и токсинообразование.

В гладкой форме вирулентные штаммы бруцелл имеют О- и Vi-антигены, а в зависимости от вида - различное количество соматических антигенов - А и М. Эти антигены видоспецифичны: у Br.melitensis в большом количестве содержится М-антиген, у Br.abortus иBr.suisпреобладает А-антиген. Кроме того, у бруцелл различают С, Р антигенные детерминанты.

Все виды бруцелл продуцируют эндотоксин, а также фермент агрессии-гиалуронидазу. Бруцеллы отличаются высокой агрессивностьюи инвазивностью, вследствии чего проникают в организм через неповрежденные покровы и как абсолютные паразиты развиваются в нем внутриклеточно, но могут также находиться вне клетки.

Резистентность

Бруцеллы малоустойчивы к высокой температуре. В жидкой среде при +60С они погибают через 30 минут, при +80-85С-через 5 минут, при кипячении моментально. Под действием прямых солнечных лучей бруцеллы гибнут через 4-5 часов, в почве сохраняют жизнеспособность до 100 дней, в воде-114 дней; на поверхности-2 суток. Длительно сохраняются в пищевых продуктах: в молоке 1,5 месяцев, масле-до 1 месяца. В испражнениях больных до 2,5 месяца, в моче-5 месяцев.

Возбудители бруцеллеза весьма чувствительны к различным дезинфицирующим веществам: 2% раствор карболовой кислоты, 3% раствор креолина и лизола, 0,2%-1% раствор хлорной извести и хлорамина убивают их в течение нескольких минут.

Эпидемиология.

Бруцеллез – хронически протекающая болезнь животных и человека.

Возбудителями бруцеллеза у человека являются виды Br.melitensis, Br.abortus, Br.suis.

Основными источниками инфекции для людей при бруцеллезе являются овцы, козы, крупныйрогатый скот и свиньи.

Роль человека в передачи бруцеллезной инфекции эпидемиологического значения не имеет.

Пути заражения человека бруцеллезом разнообразны. Заражение происходит преимущественно контактным (с больными животными или сырьём и продуктами животного происхождения) или алиментарным путём.

Эпидемическое значение пищевых продуктов и сырья животного происхождения определяется массивностью обсеменения, видом бруцелл, их вирулентностью, длительностью их сохранения. Так, в молоке бруцеллы сохраняются от 10 дней до 1,5 месяцев, брынзе – до 45 дней, во внутренних органах, костях, мышцах и лимфатических узлах инфицированных туш – более одного месяца, в шерсти – до 3 месяцев.

Возможны случаи заражения людей контактным и аэрогенным путём при работе с вирулентными культурами бруцелл.

Для заболевания людей бруцеллёзом, вызванным козье-овечьим видом, характерна весенне-летняя сезонность. При заражении бруцеллезом от крупно- рогатого скота сезонность выражена слабее, что объясняется длительным периодом лактации и заражением в основном через молоко и молочные продукты.

Бруцеллёз человека – тяжелое заболевание. Инкубационный период равен 1-2 недели, а иногда затягивается до 2-х месяцев. Это зависит от количества попавших микробов, их вирулентности и сопротивляемости организма.

После инкубационного периода клиника бруцеллеза у человека проявляется в форме острого заболевания с выраженной лихорадочной реакцией (до 39-40˚С) в течение 3-7 дней и более. Повышение температуры сопровождается ознобом и обильным потоотделением. При раннем применении антибактериальной терапии может наступить полное выздоровление. Однако чаще происходит дальнейшее прогрессирование клинических проявлений в виде рецидивирующего бруцеллеза или активного хронического процесса с поражением опорно-двигательного аппарата, нервной, мочеполовой и сердечно-сосудистой систем.

Патогенез:проникнув в организм, бруцеллы поражают регионарные лимфоузлы, где усиленно размножаются, затем по лимфопутям попадают в селезёнку, костный мозг, лимфоузлы, где длительно сохраняются, располагаясь внутриклеточно. В результате этого поражаются многие органы и системы, но чаще нервная, опорно-двигательная и половая.

Бруцеллёз характеризуется постепенным началом, разнообразием симптомов (лихорадка, аллергия, характеризующая повышенной чувствительностью замедленного типа, потливость, плаксивость и повышенная раздражительность, артриты, миозиты, тендовагиниты, бурситы, спондилиты, радикулиты, невриты, фиброзиты, эпидидимиты, софориты, эндометриты), и разной длительностью течения: острые формы продолжаются от 2 недель до 3 месяцев, хронические – от 3-4 месяцев до 1-2 лет.

ИММУНИТЕТ.

После перенесённого заболевания формируется непрочный и непродолжительный иммунитет, он сохраняется в течение 6-9 месяцев. Нередко люди, перенесшие бруцеллез, вновь заболевают этой инфекцией. Иммунитет при бруцеллёзе имеет нестерильный характер.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА.

Материалом для исследования при бруцеллезе у больных людей является кровь (в некоторых случаях костный мозг), моча, желчь, грудное молоко, мокрота, спинномозговая жидкость, экссудат при бурситах и другие выделения. Выделение культур производят в специальных лабораториях ООИ.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

1.Серологический – основной

2.Аллергический

3.Бактериологический

4.Биологический

5.Микроскопический

Серологический метод является наиболее приемлемым в медицинской практике. В сыворотке больных бруцеллезом накапливаются агглютинирующие (вначале JgM, затем JgG), неполные блокирующие (JgA и JgG) и опсонические (JgG) антитела. Для их выявления с диагностической целью используют пробирочную (Райта) и пластинчатую (Хеддльсона) РА, РПГА, РИФ, опсоно-фагоцитарную пробу и для выявления неполных Ат – антиглобулиновую пробу Кумбса.

Реакцию Райта проводят в пробирках в объёме 0,5мл с разведениями сыворотки 1:25, 1:50, 1:100, 1:200, 1:400 и единым бруцеллёзным диагностикумом.

Диагностикум представляет собой взвесь бруцелл, убитых нагреванием и фенолом и окрашенных в синий цвет. Для пробирочной реакции диагностикум разводят в 10 раз карболизированным (0,5%) физраствором.

Диагностикум вносят в объёме 0,5 мл. В результате конечные разведения сыворотки удваиваются (1:50, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800).

Пробирки встряхивают и ставят в термостат при 37˚С до следующего дня. Учёт реакции проводят обычным способом (можно и без агглютиноскопа). Выраженность реакции оценивают следующим образом: положительная РА в титре 1:100 – сомнительная; в титре 1:200 – положительная; в титре выше 1:200 – резко положительная. При сомнительных результатах реакции Райта (1:50), при отрицательных результатах, не соответствующих клинико-эпидемиологическим данным, а также при предшествующей вакцинации больного против бруцеллеза реакцию Райта ставят повторно с интервалом между взятием крови 7-10 дней. Положительным результатом считают нарастанием титра.

В условиях массового обследования на бруцеллез применяют РА на стекле – пластинчатую реакцию Хеддльсона в сочетании с аллергической пробой.

Она специфична, достаточно чувствительна, проста в постановке и даёт возможность выявлять агглютинины в первые дни болезни и быстро получать ответ.

На большое (9×12 см) хорошо обезжиренное сухое стекло на расстоянии 3-4 см друг от друга микропипеткой наносят испытуемую сыворотку в дозах 0,04, 0,02, 0,01 (опытные капли) и 0,02 мл (контрольная капля). К трём первым каплям сыворотки добавляют по 0,03 мл единого неразведенного диагностикума, к последней – 0,03 мл физраствора (КС). Готовят КА – 0,03 мл Аг и 0,03 мл физраствора. Сыворотку и Аг смешивают стеклянной палочкой и слегка подогревают стекло, высоко держа его над пламенем горелки. При положительном результате в опытных каплях появляются хлопья, и жидкость становится более или менее прозрачной. Максимальный срок наблюдения – 8 мин. Учёт осуществляют невооружённым глазом по четырехплюсовой системе. Агглютинацию во всех 3-х дозах на 4+ принимают за резко положительный результат, в первой и второй дозах – за положительный, только в первой – за сомнительный, отсутствие агглютинации во всех дозах – за отрицательный результат.

Предложена РПГА с эритроцитарным полисахаридным диагностикумом. Диагностический титр РПГА 1:100 и выше.

В случае отрицательной реакции Райта, особенно при подострых и хронических формах бруцеллеза, ставят реакцию Кумбса на определение блокирующих Ат, которые появляются в подострую фазу болезни, могут присутствовать долгие годы, обладает способностью тормозить агглютинацию. Возможно их присутствие у больных в титрах в 2-8 раз более высоких, чем агглютинины.

Для диагностики бруцеллеза предложена также опсоно-фагоцитарная реакция, которую вследствие вариабельности результатов и трудоемкости постановки и учета используют редко.

Аллергический метод применяют для установления состояния сенсибилизации (ГЗТ) к бруцеллам, наблюдающегося у больных бруцеллезом, инфицированных бруцеллами лиц и привитых живой бруцеллезной вакциной (между 2-13 месяцами после вакцинации) людей. Пробу Бюрне ставят путём введения туберкулиновым шприцем 0,1 мл бруцеллина (аллергена) внутрь кожи ладонной поверхности предплечья. У сенсибилизированных людей реакция возникает спустя 6-8 часов после введения аллергена, достигает максимума к 24, иногда 48 часам, проявляется в образовании отёчного инфильтрата. Реакцию учитывают через 24 часа путём осмотра и ощупывания места введения бруцеллина, а также замера параметров отека. За положительную реакцию принимают отек размером 2×3 см. Его отсутствие, отек меньших размеров или поздно появившийся отек принимают за отрицательную реакцию. Диагностическая ценность аллергического метода снижается из-за того, что сенсибилизация к бруцеллину часто наблюдается у инфицированных бруцеллами и выздоровевших от бруцеллеза лиц.

(PS.Бруцеллин – фильтрат трёхдневной убитой нагреванием бульонной культуры бруцелл).

Бактериологический метод.

Чаще выделяют гемокультуру или уринокультуру, реже используют желчь, костный мозг, пунктат из лимфоузлов и другой материал. Посевы крови рекомендуется делать во время лихорадочного состояния больного. Нельзя брать кровь в период лечения антибиотиками.

Ι ЭТАП

1. Кровь по 5-10 мл засевают в 2 флакона с жидкой элективной средой; пунктаты из костного мозга или лимфоузлов засевают по несколько капель в 2 пробирки с жидкой элективной средой; стерильно взятую мочу обрабатывают бруцеллезной сывороткой агглютинирующей в конечном разведении 1:16, центрифугируют и осадок высевают на те же среды, добавив к ним генцианвиолет в концентрации 1:200 тыс. для задержки роста грам + микрофлоры.

ΙΙ ЭТАП:

1. Из типичных для бруцелл колоний делают отсевы на скошенные элективные среды → 37˚С 24-48 час.

ΙΙΙ ЭТАП:

1. Проверяют однородность выделенной чистой культуры, т. е. делают мазок по Граму.

2. Делают посев на короткий «пёстрый» ряд Гисса и элективный бульон с 2 индикаторными бумажками (на индол, на сероводород) → 37˚С 24-48 час.

3. Ставят РА на стекле с поливалентной бруцеллезной сывороткой и чистой культурой.

4. С чистой культурой ставят РИФ.

5. Чистую культуру проверяют на фаголизабельность с помощью бруцеллезного бактериофага диагностического. Для этого засевают взвесь исследуемой культуры (0,1 мл) на чашку Петри с элективной средой, подсушивают, наносят каплю бактериофага и дают ей стечь в виде «дорожки» → +37˚С 24-48 час. При положительном результате по ходу «дорожки» наблюдается лизис культуры.

6. Ставят пробу для определения уреазной активности, т. е. посев на среду с мочевиной → +37˚С 24-48 час.

7. Проверяют бактериостатическое действие красителей, т. е. делают посевы чистой культуры на плотные элективные среды в чашках Петри с фуксином и тионином → +37˚С 1-2-5 суток.

8. Ставят РА на стекле с моноспецифическими бруцеллезными сыворотками.

9. Проба на чувствительность к антибиотикам на элективной среде.

PS. Выделение и идентификация культур допускается в специальных

лабораториях при строгом соблюдении правил техники

безопасности.

Биологический метод.

Если исследуемый материал загрязнен или концентрация бруцелл в нем невелика, единственно надежным методом исследования является биологический. Исследуемый материал вводят п/кожно в паховую область в дозе 0,5 мл белым мышам и 1,0 мл морской свинке . Вскрытие зараженных белых мышей производят через 20 дней, а морских свинок – через 30 дней. Перед вскрытием м/свинке ставят кожно-аллергическую пробу и берут кровь из сердца для реакции Райта (нормальный титр РА у свинок ниже 1:10). Проводят посевы лимфоузлов и кусочков органов на плотные и жидкие элективные среды и далее исследуют как при бактериологическом методе.

Лечение и профилактика.

На каждый случай заболевания (подозрения) бруцеллезом врач, средний медицинский работник обязан заполнить «экстренное извещение» (уч. Ф. №58/у), которое в течение 12-ти часов высылается в территориальный ЦГЭ. В оперативном порядке информация сообщается в тот же ЦГЭ по телефону.

В качестве средств специфической терапии применяют антибиотики с учетом спектра чувствительности выделенного штамма; вакцинотерапию бруцеллезной лечебной вакциной (взвесь убитых нагреванием бруцелл); для предупреждения рецидивов рекомендуется вводить противобруцеллезный иммуноглобулин.

Для специфической профилактики бруцеллеза проводят иммунизацию людей сухой живой вакциной, приготовленной из вакцинного штамма коровьего вида (В. abortus` 19-BA).

Вакцинации подлежат лица с четкими отрицательными серологическими и аллергическими реакциями на бруцеллез.

Прививки не проводятся лицам моложе 18 лет, женщинам в период беременности и грудного вскармливания, а также имеющим противопоказания по состоянию здоровья.

БАЦИЛЛЫ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

НДД:

Постановление МЗ РБ МСХП РБ №20/52 от 10 апреля 2003г.

«Ветеринарные и санитарные правила по профилактике и борьбе с сибирской язвой»

Таксономия.

Возбудитель сибирской язвы – Bacillusanthracis (anthrax – углевик), описанный в 1849г. А. Поллендером и выделенный Р. Кохом в 1876г., относится к семейству Bacillaceae.

Семейство Bacillaceaeвключает роды:

Sporosarcina, Bacillus, Clostridium. В определителе Берги (1974) дано 48 видов бацилл, разделенных на 2 группы.

Bacillus anthracisвызывает сибирскую язву у животных и человека; Bacillus cereus - условно-патогенна для человека.

Морфология.

Возбудитель сибирской язвы – крупная 4-10 мкм в длину, 1-2 мкм в ширину, палочка, образующая овальную центральнорасположенную спору в аэробных условиях, с обрубленными или даже вогнутыми концами; неподвижная; в организме животных и человека, на сывороточных и кровяных средах образует капсулу; грам+; в мазках располагается цепочками разной длины или попарно.

Bacillus anthracis существует в двух основных формах – бациллярной и споровой.

Спорообразование происходит лучше в присутствии кислорода и при t° 30-40°С, оно утрачивается в организме животных и человека и не происходит при t° выше 43°С и ниже t° 15°С.

Культуральные свойства.

Bacillus anthracis – аэроб или факультативный анаэроб. Optim. t° 37°С, температурный диапазон от 12 до 42°С, хорошо растет на простых питательных средах при pH 7,2-7,6; рост появляется через 18-24 часа.

На СПА – образует шероховатые колонии R – формы с неровными краями, от которых отходят пучки нитей переплетающихся, что придает им вид львиной гривы или головы медузы.

На СПБ – образует осадок на дне пробирки в виде комочка ваты, а среда остается прозрачной.

При росте на СПА с пенициллином Bacillus anthracisутрачивает типичную морфологию: в мазках вместо палочек видны бусины, соединенные в цепочку - тест «жемчужного ожерелья».

Могут диссоциировать из R-форм в S-формы колоний, которые не образуют капсулу в организме животных и человека, они невируленты, а в мазках из них видны кокковидные или диплобациллярные клетки в виде скоплений.

Ферментативные свойства.

Биохимическая активность бацилл сибирской язвы высокая.

Желатин разжижают послойно в виде елочки, опрокинутой вниз вершиной.

Молоко свертывают и пептонизируют.

Образуют аммиак и сероводород, не образуют индол.

Ферментируют с образованием кислоты глюкозу, мальтозу и сахарозу (левулезу, трегалозу, декстран). Маннит ±, лактозу не ферментируют.

Токсикообразование.

Образуют эндотоксин, представляющий собой белковый комплекс из нескольких компонентов (летального, вызывающего отек, и протективного, т.е. антигена, индуцирующего продукцию неполных антител).

Антигенная структура.

Возбудитель имеет капсульный протеиновый и соматический полисахаридный родовой антигены.

Полисахаридный антиген находится в клеточной стенке микроба, термоустойчив. Против этого антигенного комплекса защитные антитела не продуцируются. Он длительно сохраняется во внешней среде, В культуре, в трупном материале. На обнаружении его основана реакция термопреципитации по Асколи.

Протеиновый антиген находится в капсуле, обусловливающей антифагоцитарную активность. У сибиреязвенных бацилл, антракоидов, ложносибиреязвенных бацилл и спорообразующих сапрофитов имеется общий антиген – гаптен, вызывающий выработку неполных антител.

Резистентность.

В живом организме возбудитель существует в вегетативной форме, в окружающей среде образует устойчивую спору.

Вегетативные формы малоустойчивы: погибают при 60° С в течение 15 мин., при кипячении – через минуту. Споры высокорезистентны: сухой жар убивает их при температуре 140° С в течение 2 – 3 час., в автоклаве при температуре 121° С они погибают через 15 – 20 мин. Споры десятилетиями сохраняются в почве.

Под воздействием 1 % формалина они разрушаются через 2 часа, а обычные дезинфицирующие средства губят их только через 1 – 2 суток.

Восприимчивость животных.

К возбудителю сибирской язвы восприимчивы крупный и мелкий рогатый скот, лошади, верблюды, свиньи, дикие животные,

Из лабораторных животных к возбудителю сибирской язвы чувствительны белые мыши, морские свинки и кролики. После заражения животные погибают через 2 – 4 дня. Вследствие антикоагулянтного действия сибиреязвенных бацилл кровь погибших животных не свертывается, она густая, черно-красного цвета.

Патогенез заболевания у человека.

Сибирская язва – особо опасная болезнь животных и человека. Болезнь у животных протекает сверхостро, остро и подостро, а у свиней – бессимптомно, в основном в локальнойангинозной форме.

У людей сибирская язва чаще проявляется в карбункулезной форме и лишь изредка осложняется сибиреязвенным сепсисом, в отдельных случаях может развиваться первичная генерализованная инфекция, проявляющаяся в легочной или кишечной форме.

Источник возбудителя инфекции– больное животное, реже больной человек. Экскреты заболевших животных (кал, моча, кровянистые истечения из естественных отверстий) содержат бациллы, которые на воздухе превращаются в споры. Контаминированные сибиреязвенными спорами участки почвы и другие объекты внешней среды длительное время являются резервуарами и факторами передачи возбудителя инфекции.

Основной путь заражения животных – алиментарный – через корма и воду. Возможны также трансмиссивныйи аспирационный пути заражения.

Заражение человека происходит контактным путем - при уходе за больными животными, в процессе их забоя, снятия шкур, разделки туш, кулинарной обработки мяса, уборки и уничтожения трупов, первичной обработке и реализации контаминированного животного сырья. Возможно заражение человека при контакте с контаминированной почвой, а также аспирационным и трансмиссивным путями.

Инкубационный период 2 -3 дня.

Выделяют 4 клинических формы:

·кожная – возбудитель проникает через поврежденные кожные покровы, чаще поражаются открытые части тела (лицо, шея, кисти рук, предплечья); в участке локализации образуется сибиреязвенный карбункул - очаг геморрагически некротического воспаления глубоких слоев кожи с образованием буро-черной корки (anthrax -уголь); сибиреязвенные палочки в большом количестве находятся под струпом, в лимфатических сосудах, регионарных лимфоузлах и в тромбированных венах. Несмотря на частую бактериемию, сепсис развивается редко.

·легочная – развивается при аэрогенном заражении во время работы с материалом, инфицированным спорами бацилл; болезнь протекает по типу тяжелой бронхопневмонии с геморрагическими поражениями легких и интоксикацией; летальность высокая.

·кишечная – возникает в результате употребления в пищу мяса больных животных, поскольку при кулинарной обработке мяса вегетативные формы погибают, а споры остаются. Отмечается тяжелейшее поражение слизистой оболочки кишечника с кровоизлияниями и очагами некроза. Бациллы выделяются с испражнениями. Отмечается интоксикация; летальность высокая.

·септическая – как осложнение при любой форме может развиваться сибиреязвенная септицемия.

В настоящее время на территории СНГ кожная форма регистрируется спорадически, кишечная – крайне редко, легочная – почти не встречается. В Белоруссии кожная форма встречается в виде редких единичных случаев, а другие формы давно ликвидированы.

Иммунитет.

В результате перенесенного заболевания формируется стойкий иммунитет.

Однако возможны рецидивы (промежутки от нескольких месяцев до 1-3 лет), повторные заболевания протекают легче.

Лабораторнаядиагностика.

Материалом для исследования служат: содержимое карбункула, мокрота, испражнения, кровь, моча.

Используют следующие методы:

–бактериологический – основной;

–микроскопический;

–биологический;

–аллергический;

–серологический.

Бактериологическое исследование проводят с соблюдением правил техники безопасности, как при ООИ.

I этап

1.Из материала готовят мазки и окрашивают их по Граму, по Ожешко и по Бурри-Гинсу, - микроскопируют и дают предварительный ответ.

2.Материал засевают на СПА и СПБ → 37°С 24 часа.

3.С материалом ставят ускоренную пробу: внутрибрюшинно заражают белых мышей (2-3), через несколько часов из перитонеального содержимого делают мазки – если типичные бациллы с капсулой – дают ответ предварительный.

4.С материалом ставят РИФ: бациллы светятся ярко, остальные микробы не люминесцируют (ускоренный метод).

II этап

1.На СПА отбирают 3-5 подозрительных на Bacillus anthracis колонии и делают отсев на скошенный агар → 37°с 24 часа.

iii этап

1.Проверяют однородность чистой культуры в мазке по Граму.

2.Проверяют капсулообразование в мазке по Бурри-Гинсу (бациллы сибирской язвы+, а сапрофиты, кроме Bacillius cereus -).

3.Проверяют подвижность культуры в препарате«висячая капля» или делают посев в столбик 0,3% агара → 37°С 24 часа, (Bacillus anthracis-, сапрофиты+).

4.Проверяют гемолитическую активность, делая посев на 5% кровяной агар → 37°С 24 часа (Bacillus anthracis-, сапрофиты+).

5.Тест «жемчужного ожерелья»: делают посев на СПА с пенициллином → 37°С 24 часа, затем из колонии – мазок по Граму: бациллы в виде шаров, расположенных цепочкой, грам+.

6.Фаголизабельность чистой культуры специфическим сибиреязвенным фагом.

7.Вирулентность проверяют, заражая п/к кролика; через 2-3 суток он погибает от септицемии, отмечается отсутствие трупного окоченения, несвернувшаяся густая темная кровь, в мазках – капсульные грам+ палочки.

8.Счистой культурой ставят РИФ (сапрофиты не люминесцируют).

9.Проба на чувствительность к антибиотикам: посев на АГВ → 37°С 24 часа.

IV этап

1.Учет результатов и выдача ответа.

Аллергический метод проводят при необходимости установить ретроспективный диагноз сибирской язвы в случаях с отрицательным результатом бактериологического исследования.

Применяют внутрикожную пробу с антраксином – аллергеном из сибиреязвенных бацилл. Через 24-48 часов положительная реакция характеризуется появлением инфильтрата и гиперемии.

Реакция термопреципитации по Асколи применяется для выявления сибиреязвенного Аг в трупах павших животных, некротической ткани карбункулов, кожевенном сырье и готовой продукции.

Для получения экстракта из патологического материала и от здоровых животных материал (органы) измельчают, заливают 25-50 – кратным объемом физраствора, кипятят 5-10 мин., фильтруют через фильтровальную бумагу или асбестовую вату. Прозрачный фильтрат используют как Аг.

Техника постановки следующая: в преципитационную пробирку пастеровской пипеткой вносят 2.2- 0,3 мл преципитирующей сибиреязвенной сыворотки (на дно, не касаясь стенок пробирки), а затем на нее по стенке наклоненной пробирки осторожно (для предупреждения смешивания растворов) наслаивают такое же количество испытуемого экстракта.

К опыту ставят контроли:

1) преципитирующая сыворотка и стандартный сибиреязвенный Аг;

2) преципитирующая сыворотка и физраствор;

3) нормальная сыворотка и исследуемый экстракт;

4) преципитирующая сыворотка и экстракт органов здорового животного.

Первый контроль -заведомо положительный, остальные- заведомо отрицательные. В положительном случае в опытной пробирке через 1-15 мин. на границе соприкосновения сыворотки и экстракта появляется кольцо молочно-белого цвета. Реакция очень чувствительна.

Лечение.

Главное -своевременное введение в/мыш. противосибиреязвенного иммуноглобулина (30-50 мл) и прием антибиотиков с учетом антибиотикограммы.

Профилактика.

Для специфической профилактики сибирской язвы у людей используются следующие препараты:

- живая сибиреязвенная вакцина СТИ (предложена Н.Н.Гинсбургом и А.Л.Тамариным; представляет собой споровую культуру бескапсульного варианта сибиреязвенных бацилл для накожного и подкожного применения;

- химическая сибиреязвенная вакцина (из сорбированного на носителе протективного антигена, который получают из вакцинного штамма);

- комбинированная сибиреязвенная вакцина (комбинация из спор ослабленног штамма и протективного антигена, сорбированного на геле гидроксида алюминия);

- рекомбинантная сибиреязвенная вакцина;

- противосибиреязвенный иммуноглобулин, вводят лицам, имевшим контакт с больными сибирской язвой животными или употреблявшими в пищу их мясо, внутримышечно по 20 – 25 мл в течение 5 – 10 дней.

Иммунизации подлежат лица, работающие с живыми культурами

возбудителя сибирской язвы, зараженными лабораторными животными или

исследующие материал, инфицированный возбудителем сибирской язвы;

зооветработники и другие лица, профессионально занятые содержанием

скота, а также убоем, разделкой туш и снятием шкур; лица, занятые

переработкой сырья животного происхождения; животноводы, заготовители

и прочие лица в возрасте от 14 до 60 лет, проживающие и вновь прибывшие

на постоянное место жительства в неблагополучные по сибирской язве

населенные пункты.

В 1 мл вакцины накожного метода содержится 4 млрд. микробных тел, в вакцине для подкожного применения - 100 млн. Вакцина СТИ быстро (через 48 часов) создает иммунитет продолжительностью более 1 года. Ее вводят однократно. Ревакцинация взрослого населения в неблагополучных пунктах должна проводиться однократно ежегодно в течение 4-х лет после каждого проявления активности. По истечении этого срока прививки возобновляются на тот же период лишь в случае рецидива активности.

Лицам, имевшим контакт с больными сибирской язвой животными или употреблявшими в пищу их мясо, целесообразно в течение 5-10 дней вводить в/мышечно по 20-25 мл противосибиреязвенного иммуноглобулина.

Общая профилактика сибирской язвы включает комплекс хозяйственных, санитарных, ветеринарных и медицинских мероприятий.

Медицинский работник, выявивший больного или подозрительного на заболевание сибирской язвой человека, обязан оказать ему первую помощь и передать информацию об этом в территориальный ЦГЭ (по телефону немедленно, письменно экстренное извещение (форма № 58/у) - в течение 12 часов).

Лабораторная диагностика сибирской язвы у людей осуществляется на базе бактериологических лабораторий отделов ООИ, а все культуры возбудителя сибирской язвы, выделенные на территории Республики Беларусь, подлежат окончательной идентификации в Республиканском центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья (ГУ РЦГЭ и ОЗ).

При сибирской язве проводят профилактическую, текущую и заключительную дезинфекцию.

В очаге инфекции за всеми контактными устанавливается медицинское наблюдение (с термометрией) на протяжении 8 суток после госпитализации больного и заключительной дезинфекции.

Трупы животных, павших от сибирской язвы, а также все продукты убоя, сжигают, захоронение (зарывание) категорически запрещается!

Трупы людей, умерших от сибирской язвы, когда диагноз подтвержден лабораторно, вскрытию не подвергаются.

Захоронение трупов людей, умерших от сибирской язвы, производят на обычном кладбище в соответствии с правилами, которые предъявляют при захоронении умерших от сибирской язвы (закапывают на глубину не менее 2 м и засыпают хлорной известью).

Лабораторные культуры, остатки материала, инструменты и посуду обеззараживают автоклавированием при 1,5 атм. (132°С) в течение 2-х часов.

Приложение 1

Дифференциальные признаки

B. anthracis, антракоидов и почвенных бацилл.

Условные обозначения: + наличие капсулы; - отсутствие подвижности, капсулы.

ТАБЛИЦА

Дифференциальные признаки

B. anthracis, антракоидов и почвенных бацилл.

Условные обозначения: + наличие капсулы;- отсутствие подвижности, капсулы.