Лекция Тема: «ЛИСТЕРИИ»

Лекция

Тема: «ЛИСТЕРИИ»

План

1. Листерии, их морфологические и культуральные свойства, биохимическая активность. Механизм заражения, клинические проявления. Профилактика листериоза.

ЛИСТЕРИИ

НДД:

Постановление МЗ РБ №155/38 от 31. 12.2002г.

Санитарные и ветеринарные правила «Листериоз».

Таксономия

Возбудитель листериоза – L.monocytogenesотносится к роду Listeria семейства Corynebacteriacea отделаFirmicutes.

Морфология.

Листерии мелкие кокковидные палочки или слегка изогнутой формы с закругленными концами, длиной 0,5-2мкм и шириной 0,4-0,5 мкм, но в старых культурах могут иметь нитевидную форму длиной до 200мкм. В мазках часто располагаются параллельно или под углом друг к другу в виде римской цифры V, либоY-образно, или образуют короткие цепочки из 3-5 клеток. Спор и капсул не образуют. Подвижны (перитрихи), при выращивании при 20-25⁰С совершают характерные «кувыркающиеся» движения. Культивирование при 37⁰С приводит к резкому снижению подвижности вплоть до ее потери. Грамположительны, но в старых культурах могут быть грамотрицательными.

Культуральные свойства.

Листерии – факультативные анаэробы. Растут в интервале температур от 4 до 38⁰С (особенно в присутствии небольших количеств глюкозы), optimt⁰30-37⁰С; физиологическое развитие происходит при 18-20⁰С (optimt⁰для образования жгутиков, но удлиняет срок выделения и роста культуры). Листерии культивируются на простых средах, но растут довольно слабо; хорошо растут на средах с добавлением глюкозы, сыворотки или крови. Селективной средой для выделения листерий является кровяной агар с добавлением трипофлавина (акрифлавина) и налидиксовой кислоты.

На пластинчатых средах изолированные 24-48 часовые колонии мелкие (1-2мм), больших размеров достигают на средах с глюкозой. Образуют S- иR-диссоциаты.S-колониигладкие, резко очерченные, выпуклые (позднее происходит их уплотнение с центральным возвышением), прозрачные, бесцветные или нежно-голубоватые, в падающем свете серовато-молочные.

На кровяном агаре могут быть окружены зоной β-гемолиза; увеличение гемолитической активности наблюдают при уменьшении содержания О₂.

R-колониишероховатые, с утолщенным зарубленным краем и возвышающейся грубозернистой массой, достигают 1,5-3мм; S- R- переход сопровождается снижением гемолитической активности и потерей вирулентности.

На скошенном СПА (сахарном агаре) листерии образуют сплошной тонкий и голубоватый налет, иногда с трудом обнаруживаемый.

В жидких средах дают равномерное помутнение, с последующим выпадением осадка; осадок слизистый, трудно диспергируемый, иногда поднимается в виде косички.

В полужидких средах дают рост по уколу, более обильный у поверхности с отходящим помутнением (особенно на глубине 3-5мм); в желатине с глюкозой растут в виде «щепотки» или «вязанки хвороста».

Культуры листерий имеют характерный запах творога или молочной сыворотки, обусловленный накоплением продуктов углеводного обмена.

Биохимические свойства.

Листерии обладают высокой ферментативной активностью. Они гидролизуют гиппурат. Ферментируют с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, рамнозу, левулезу, трегалозу, медленно лактозу и сахарозу, не расщепляют маннит и крахмал, ксилозу.

Каталазоположительные, оксидазоотрицательные. Индол и сероводород не образуют, желатин не разжижают, не восстанавливают нитраты в нитриты, лакмусовое молоко краснеет, но не свертывается. Не обладают уреазной активностью. Обладают гемолитической активностью и дают положительную реакцию Фогеса-Проскауэра.

На среде с углем дают положительную летициназную активность, на среде без угля ЛВА отсутствует.

Антигенная структура и факторы патогенности.

У листерий выделяют О-Аг и Н-Аг; по структуре 5 термолабильных жгутиковых (Н-) и 14 термостабильных углеводных соматических (О-) антигенов выделено 16 сероваров. Три серовара (4b, 1/2b, 1/2а) вызывают 90% всех случаев листериоза человека.

Основной фактор патогенности листерий – эндотоксин. Другие факторы патогенности: интерналин(мембранный белок, обличающий проникновение бактерий в макрофаги и эндотелиоциты), листериолизин О(гемолизин, вызывающий повреждение мембран фаголизосом, благодаря ему бактерии способны мигрировать из фаголизосом и вегетировать в цитоплазме клеток; считается основным фактором патогенности); фосфолипазы(вызывают растворение клеточной мембраны и проникновение в клетки, в том числе и макрофаги, что защищает листерии от действия АТ).

Эпидемиология и патогенез.

L.monocytogenesраспространена повсеместно.

Листериоз– зооантропонозное заболевание с природной очаговостью и множественными источниками инфекции. Основной природный резервуар – грызуны, травоядные и птицы. А также большинствосельскохозяйственных и домашних животных.

Листерии устойчивы во внешней среде; при умеренных и низких температурах в почве сохраняются (и даже размножаются) в течение месяцев и лет. На фураже жизнеспособны до 3 лет; длительно переживают и размножаются в мясе и молоке при 4-6⁰С. При кипячении погибают в течение 3-5 мин; также неустойчивы к действию дезинфицирующих веществ.

Заболеваемость у животных может носить эпизоотический характер (особенно у молодняка). Основные пути заражения – алиментарный и трансмиссивный (через кровососущих членистоногих). Характерный признак заболевания – выраженный моноцитоз в периферической крови, что обусловило видовое название возбудителя. Из организма больного животного возбудитель выделяется с мочой; испражнениями, носовым отделяемым; молоком, околоплодной жидкостью.

Заболеваемость у людей носит преимущественно профессиональный характер.

Основные пути заражения:

ü контактный (через кожу и слизистые);

ü алиментарный;

ü аэрогенный (при работе с кормами);

ü трансмиссивный.

Поскольку заболевание развивается только у 20% инфицированных лиц, то листериоз можно рассматривать как оппортунистическую инфекцию.

Входные ворота для возбудителя – миндалины, слизистые оболочки глаз, дыхательных путей, полости рта и кишечника, а также микротравмы кожных покровов.

Возбудитель может диссеминировать по кровеносным и лимфатическим путям и проникать в различные органы и ткани, в том числе мозговые оболочки и ЦНС.

Клинические проявления.

Инкубационный период 2-4 недели; заболевание начинается остро, с подъемом t⁰тела до 38-41⁰С, озноб, головной болью, тошнотой, рвотой. Нередко наблюдается гриппоподобный комплекс, боль при глотании, лимфадениты и конъюнктивиты. Температура держится 7-14 суток (3-22 суток), затем литически (реже критически) падает. Отмечают инъекцию склер и гиперемию лица. С 1-5-го дня болезни может появиться полиморфная сыпь, истекающая ко времени окончания лихорадочного периода.

По типу течения выделяют острые, подострые, хронические и абортивные инфекции.

По характеру проявлений выделяют следующие формы:

ü ангинозно-септическую (с мононуклеозом);

ü окологландулярную;

ü септико-тифозную;

ü листериоз ЦНС;

ü листериоз беременных;

ü септико-гранулематозную (сепсис новорожденных).

Прогноз заболеваний серьезный; 30% случаев листериоза взрослых (60% у лиц иммунодефицитами) заканчивается фатально.

Особую опасность представляет внутриутробное заражение плода, обычно приводящее к выкидышам или мертворождениям. У плода или новорожденного наблюдаются многочисленные абсцессы и гранулемы (листериомы), особенно в легких, печени и ЦНС. Менингиты возникают в течение 3 недель после рождения; молниеносные формы листериоза новорожденных сопровождаются 54-90% смертностью.

Иммунитет: гуморальный и клеточный.

При этом происходит стимуляция активности макрофагов и формирование ГЗТ. Все это приводит к благоприятному исходу болезни.

Принципы микробиологической диагностики.

Основу распознавания заболевания составляют выделение и идентификация возбудителя, т.е. бактериологическое исследование.

Материал для исследования – кровь, ликвор (СМЖ), слизь из зева, пунктаты увеличенных лимфатических узлов, у новорожденных дополнительно – меконий, пупочная кровь; секционный материал (кусочки мозга, печени, селезенки, лимфатические узлы).

Посевы рекомендуют делать в первые 7-10 суток болезни. Кровь и ликвор засевают на плотные среды (глюкозный, глюкозо-печеночный или кровяной агар с глюкозой). Выросшие колонии отбирают для дальнейшего исследования по наличию гемолитической активности (на КА) либо по способности приобретать сине-зеленую окраску при косом освещении.

Серологические исследования. Обычно ставят РА с листериозным диагностикумом в конце второй недели заболевания. Реакция специфична и к этому сроку болезни становится положительной в титре 1:200 с последующим нарастанием титра АТ; последние сохраняются не менее 1-2 лет после выздоровления (реакция может быть использована для ретроспективного анализа).

Биологическая проба.Лучше всего использовать белых мышей, иммуносупрессивных введением кортизона (4-5мг в/м за 4 часа до заражения). После гибели животного (обычно на 2-6-е сутки) проводят посев материала из различных органов. Следует помнить, что листерии размножаются в мертвых тканях, и для избежания диагностических ошибок часть патологического материала следует поместить в стерильные пробирки и хранить в течение 5-10 суток при t⁰4-6⁰С, а затем подвергнуть повторному исследованию.

Лечение и профилактика.

Основу лечения и профилактики составляет проведение адекватной антибиотикотерапии (цефалоспорины, аминогликозиды).

Ведущее значение в профилактике листериоза имеют соответствующие ветеринарно-санитарные мероприятия. Определенный вклад вносят своевременное проведение дератизации и немедленное изъятие и уничтожение продуктов, испорченных грызунами (или подозрительных продуктов!). Больных лиц следует госпитализировать, а за населением неблагополучного пункта устанавливают наблюдение.