Лекция Тема : «Патогенные возбудители зооантропонозных бактериальных инфекций. Особо опасные инфекции. Возбудители чумы, туляремии».

Лекция № 26

Тема 2.7.1: «Патогенные возбудители зооантропонозных

бактериальных инфекций. Особо опасные инфекции.

Возбудители чумы, туляремии».

План

1. Особо опасные инфекции.

2. Меры безопасности при работе с возбудителями ООИ.

3. Карантинные мероприятия.

4. Возбудитель чумы, его морфологические и культуральные свойства, биохимическая активность, токсинообразование. Механизм заражения. Клинические формы. Иммунитет. Профилактика чумы.

5. Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя туляремии. Токсинообразование. Пути передачи заразного материала. Клинические формы. Иммунитет, профилактика туляремии.

ОСОБО ОПАСНЫЕ ИНФЕКЦИИ

ООИ - группа острых заразных заболеваний человека, которые:

а) способны к внезапному появлению, быстрому распространению и массовому охвату населения;

б) характеризуются тяжелым течением и высокой летальностью, нередко наступающей в первые часы болезни.

В группу ООИ включают: чуму, холеру, оспу, желтую лихорадку (это так называемые конвенционные болезни, подпадающие под действием Международных санитарных правил, прежнее название – карантинные), сыпной и возвратный тифы, вирусный грипп, полиомиелит, малярию (болезни, подлежащие международному надзору), сибирскую язву, сап, мелиоидоз, туляремию, бруцеллез, риккетсиоз, орнитоз, арбовирусные инфекции, ботулизм, гистоплазмоз, бластомикозы.

Микробиологические исследования при большинстве ООИ играют особо важную роль, поскольку от правильности и быстроты установления этиологического диагноза в высокой степени зависят своевременность, адекватность и, следовательно, эффективность противоэпидемических и лечебных мероприятий. В связи с этим в диагностике ООИ широко используют ускоренные и экспресс-методы.

В ходе исследования необходимо также исключить возможность выноса инфекции из лаборатории любыми путями и предупредить возникновение лабораторного заражения. Для обеспечения этих требований МЗ РБ утверждены инструкции о режиме работы лабораторий, которым разрешено проведение исследований по диагностике отдельных ООИ. Инструкциями предусмотрены методы, правила отбора и доставки проб в лабораторию, планировка, оборудование и режим работы таких лабораторий.

МЕРЫ БЕЗОПАСТНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С ВОЗБУДИТЕЛЯМИ ООИ.

Регламентируются Постановлением №83 МЗ РБ от 7 августа 2003г. Об утверждении и введении в действие Инструкции 3.4.11-17-13-2003 «Организация и проведение первичных противоэпидемических мероприятий в случаях выявления больного (трупа), подозрительного на заболевание карантинными инфекциями, контагиозными вирусными геморрагическими лихорадками, инфекционными болезнями неясной этиологии, представляющими опасность для населения Республики Беларусь и международного сообщения», а также следующими приложениями к Инструкции 3.4.11-17-13-2003:

Приложение 7

«Сроки выживания возбудителей ООИ во внешней среде в естественных условиях».

Приложение 8

«Правила забора материала для лабораторного исследования от больного (трупа) при подозрении на заболевания чумой, холерой, КВГЛ, малярией, Синдромами неясной этиологии».

Приложение 10

«Укладка для забора материала от больного (трупа) подозрительного на заболевание чумой КВГЛ, Синдромом неясной этиологии (для инфекционных стационаров, ЦГЭ)».

Приложение 13

«Защитная одежда, порядок применения защитного костюма».

Приложение 14

«Применение защитных костюмов».

Приложение 15

«Порядок надевания и снятия противочумного костюма».

Приложение 16

«Режимы обеззараживания».

Приложение 17

«Методы обеззараживания материала от больного, подозрительного на заболевание чумой, КВГЛ, оспой обезьян для проведения клинического анализа».

КАРАНТИННЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ

Карантин (от лат.quarantina - сорок (дней))- комплекс административно-санитарных и медико-санитарных мероприятий, направленных на предупреждение распространения инфекционных заболеваний.

Административно-санитарные мероприятия при карантине предполагают возможность закрытия государственной границы на угрожаемых участках в случае появления заболеваний чумой и холерой на собственной территории или на территории сопредельного государства. Предусматривается также возможность запрещения приема посылок из стран, неблагоприятных по холере. При отказе отдельных лиц выполнить необходимые санитарные правила им может быть воспрещен выезд за пределы страны.

Медико-санитарные мероприятия включают: опрос всех пассажиров и экипажей о состоянии здоровья, санитарный осмотр транспортных средств, багажа, грузов и в случае необходимости дезинфекция, дезинсекция и дератизация их; врачебный осмотр больных и соприкосавшихся с ними (при подозрении на перечисленные заболевания); изоляцию больных и подозрительных на заболевания до установления диагноза или извлечения; обсервацию лиц, находившихся в контакте с больными чумой и холерой, при наличии особых эпидемических показаний, с проведением санитарной обработки, размещением небольшими группами. Сроки обсервации-особенно группы людей или животных для наблюдения, контроля, лечения с целью предупреждения распространения ООИ-или врачебного контроля за лицами, бывшими в контакте с больными или прибывшими из местностей, неблагоприятных по указанным ООИ (обсервация на границе при чуме и холере, медицинское наблюдение в пути и на месте прибытия при остальных заболеваниях): при подозрении на возможность заражения чумой - 6 суток, холерой - 6 суток, желтой лихорадкой - 6 суток, натуральной оспой - 14 суток. Эти сроки соответствуют максимальному инкубационному периоду заболеваний.

Для всех лиц, выезжающих за границу и въезжающих в страну, обязательны профилактические прививки против болезней, при которых предусматривается карантинизация. Каждому привитому выдается соответствующий сертификат.

При возникновении ООИ, поскольку установление карантина по всей стране нецелесообразно, карантинные мероприятия могут поводиться в отдельных объектах (авиационных, морских и речных портах, железнодорожных узлах), домах, общежитиях и населенных пунктах с целью создания полной их изоляции от окружающих территорий.

Режимные мероприятия в карантинированном очаге включают запрещение или строгое ограничение передвижения за пределы карантинированной зоны и вывоза необеззараженного имущества, строгое ограничение передвижения людей через карантинированную зону, разобщение в очаге семей и лиц, проживающих в общежитиях, на небольшие группы, организацию продовольственного снабжения и водоснабжения населения.

ИЕРСИНИИ ЧУМЫ

Возбудитель чумы открыт в 1894г А.Йерсеном и С.Китасато.

Таксономия.

Y.pestis относится к отделу Gracillicutes, семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia.

Морфология.

Y.pestis - полиморфная мелкая овоидная палочка, жгутиков не имеет, спор не образует, может образовывать капсулу, грам- с биполярной окрашиваемостью в мазках, взятых из патологтческого материала. Размер 0,3-0,5 х 1-2 мкм. Часто дают инволюционные формы: шаровидные, колбовидные, нитевидные, зернистые; у чумной бактерии выявлено наличие фильтрующихся форм.

Культивирование.

Возбудитель чумы - факультативный анаэроб, психрофил: оптимум при 28˚С, хотя могут расти в пределах от 2 до 40˚С, рН 6,9-7-7,2. Хорошо растет на простых средах.

На СПА - через 10-12 часов колонии имеют вид мелких глыбок с неровными краями. Через 24-48часов образуют колонии R-формы: шероховатые, выпуклые, с мутно-белым центром, окруженным фестончатой каймой, напоминающие кружево, или смятые кружевные платочки. R-формы обладают высокой вирулентностью. Но могут образовывать и S-формы - гладкие, прозрачные колонии без кружевной зоны, они менее вирулентны.

На СПБ – образуют пленку, от которой ко дну тянутся слизистые нити наподобие сталактидов; в последующем образуется хлопьевидный осадок, а бульон остается прозрачным.

Для ускорения роста применяют стимуляторы: свежегемолизированную кровь, экстракты из некоторых бактерий (сарцин).

Элективными средами являются казеиновые среды и гидролизаты кровяных сгустков.

На скошенном СПА растет в виде вязкой прозрачной слизистой массы.

Переход от R формы в S формы происходит через промежуточные О-формы колоний.

Ферментативные свойства.

Бактерии чумы каталазоположительны и оксидазоотрицательны; ферментируют с образованием кислоты глюкозу, маннит, мальтозу, лактозу и арабинозу, не ферментирует сахарозу и рамнозу.

Протеолитические свойства выражены слабее: не разжижают желатин и свернутую сыворотку (сыворотку не свертывают), не образуют индол, образуют сероводород; одни штаммы ферментируют глицерин, а другие нет.

Отсутствие фермента уреазы имеет диагностическое значение для дифференциации бактерий чумы от бактерий псевдотуберкулеза, с которыми они сходны по морфологическим и культуральным свойствам.

Антигенная структура.

Возбудитель чумы имеет несколько антигенов (более 15), из них хорошо изученными являются Д-,Fl-,T-,W-,V-термолабильные антигены; есть термолабильный капсульный К-Аг и термостабильный соматический О-Аг, который под действием формалина переходит в анатоксин.

Методом преципитации в агаре у возбудителя чумы обнаружены общие антигены с другими иерсиниями, эшерихиями, сальмонеллами и шигеллами.

Токсигенность и вирулентность.

Бактерии чумы отличаются высокой вирулентностью, проникают даже через неповрежденную кожу, образуют особый токсин, высокоядовитый для мышей, бактериоцины-пестицины. Большинство факторов вирулентности (V-,W-антигены, «мышиный» токсин, Fl, коагулаза протеазы и др.) контролируется генами плазмид.

Резистентность.

Возбудитель чумы чувствителен к действию прямых солнечных лучей, высушиванию, к теплу; при 58˚С погибают в течение 30 мин, а при 100˚С – в течение 1-5мин. Малоустойчив к действию дезинфицирующих веществ: 3-5% раствор карболовой кислоты, лизола, хлорамина, хлорной извести, этиловый спирт убивают его в течение 1-10 мин.

Хорошо переносит низкие температуры, замораживание и оттаивание; в патологическом материале сохраняется до 10 суток, при 0 ˚С сохраняются до 6 месяцев. Длительное время (3-5 месяцев) они сохраняются в организме блох. В объектах внешней среды, загрязнённых другой микрофлорой, быстро погибают.

Эпидемиология.

Чума –природно-очаговое заболевание и относится к ООИ. Эпидемии чумы в средние века уносили десятки миллионов жизней. Существуют очаги чумы и в настоящее время, особенно в странах Юго-Восточной Азии. Встречаются единичные случаи заболевания в Средней Азии.

Основной источник Y.pestis – различные виды грызунов (тарбаганы, сурки, суслики, песчанки и др.; свыше 300 видов. Второстепенным источником являются домовые мыши, полёвки, зайцы, крысы.

Основной механизм передачи инфекции – трансмиссивный. Человек заражается в результате укуса инфицированной блохи, а также контактным (при убое больного животного, снятияи °шкуры, разделки туши) и пищевым (употребление недостаточно термически обработанного мяса больного животного) путями.

После заражения источником чумы является больной человек. Особо высокой контагиозностью отличается больной с легочной формой чумы. При любой форме заболевания больных изолируют, проводят строгие карантинные мероприятия.

Патогенез и клиника.

Возбудитель, проникая через кожу и слизистые оболочки, распространяется по лимфатическим сосудам, быстро размножается, вызывает интоксикацию, поражение лимфатических узлов, легких и других органов.

Инкубационный период - от нескольких часов до 6 суток, чаще 3, крайне редко до 8-10 суток.

Заболевание начинается внезапно, чаще при сильном многократном ознобе; t °быстро поднимается до 38-39 и выше. Типичны жестокая головная боль, гиперемия лица особенно конъюнктив, нарастающая общая разбитость, мышечные боли, возможны рвоты. Язык как бы «натерт мелом», припухает, речь невнятна. Из-за шатающейся походки и невнятной речи больные чумой напоминают опьяневших. Более тяжелые больные в бреду, беспокойны. У очень тяжелых больных позже отмечается цианоз, заостренные черты лица, порой появление страдальческого выражения, иногда ужаса (facies pestica). Резко нарушен ритм и наполнение пульса, частота(120-160 ударов и более в мин.), сердечные тоны глухие, артериальное давление прогрессивно снижается.

Кроме общих симптомов, имеются признаки, характерные для отдельных форм чумы.

По классификации Г. П. Руднева различают следующие формы чумы (клинические формы расположены в порядке нарастания их эпидемиологического значения):

·кожная; на коже последовательно развивается: пятно, папула, везикула, пустула, язва;

·бубонная; бубон - это увеличенный в размерах, уплотненный, резко болезненный лимфатический узел;

·кожно-бубонная;

·первично-септическая; кровоизлияния на коже, слизистых, кровотечение из почек, кишок, кровавые рвоты;

·вторично-септическая;

·первично-легочная;

·вторично-легочная;

·кишечная;обильный понос, с кровью и слизью, боли в подложечной области, тошнота, многократная рвота, высокая t°, резкая слабость, обычно вскоре наступает смерть.

Иммунитет.

Постинфекционный - стойкий и длительный (в глубокой древности народы разных стран знали об этом и использовали переболевших людей для ухода за больными и для захоронения трупов.).

Микробиологическая диагностика.

Клинически чума довольно характерна, тем не менее бактериологическая диагностика обязательна во всех случаях. Ее проводят в специальных противочумных лабораториях ( отдел ООИ Республиканский СЭС, г.Минск,ул.Казинца,50), при строгом соблюдении правил, исключающих заражение персонала и вынос возбудителя за пределы лаборатории, работают в противочумном костюме.

Для исследования от больных людей берут пунктат из бубона, содержимое пустулы и язвы, мокроту и кровь. От трупов людей и грызунов берут кусочки органов (печени, селезенки, лимфатического узла), а от загнивших трупов - костный мозг (кусочек трубчатой кости). Собранных блох разделяют по видам и, растирая в ступке 50-100 блох, исследуют полученную суспензию.

Используют следующие методы:

-бактериологический (основной);

-биологический;

-микроскопический;

-серологический.

Бактериологическое исследование проводят по этапам:

1 этап

1.Из материала готовят мазки, обрабатывают противочумной, люминисцирующей сывороткой и окрашивают синькой Леффлера и по Граму→ предварительный ответ. Подозрительными на чуму являются положительная РИФ, а также присутствие в мазках грам- овоидных биполярно окрашенных беспорядочно расположенных палочек.

2.Делают посевы материала на СПА, СПБ( бульон Хоттингера) или элективные среды→28˚-30° С 12-20 часов - 24-48 часов. При посеве загрязненного материала к средам добавляют сульфат натрия и генцианвиолет в разведениях 1:40 и 1:100 000.

3.Проводят фагодиагностику с диагностическими чумным фагом и псевдотуберкулезным фагом →предварительный ответ.

2 этап

1.Отбирают на СПА типичную колонию («кружевной платочек») и делают отсев ½ части колонии на скошенный СПА→28˚С 24 часа.

2.Оставшуюся часть колонии пересевают на среду Клиглера ( Ресселя) →28˚С 24 часа для первичной идентификации.

3 этап

1.Проверяют однородность выделенной культуры→делают мазок по Граму.

2.Посев на короткий «пестрый» ряд Гисса и СПБ с 2 индикаторными бумажками (на индол и сероводород) и среду с мочевиной→28˚С 24 часа.

3.Посев на среду Симмонса→28˚С 24 часа.

4.Посев в 2 столбика полужидкого агара→при 22˚С и при 37˚С 24 часа.

5.Биопоба с чистой культурой - решающий тест идентификации.

Биопробу ставят на морских свинках. При внутрибрюшном заражении животныепогибают на 3-5-е сутки. Экссудат из брюшной полости, кровь, соскоб с внутренних органов засевают на среды для выделения чистой культуры. В мазках из этих материалов в положительных случаях обнаруживают огромное количество типичных палочек.

6.Проверяют фаголизабельность чистой культуры чумным и псевдотуберкулезным фагами→22˚С 24 часа.

7.РА с противочумной агглютинирующей сывороткой.

8.Проба на чувствительность к антибиотикам: посев на АГВ→28˚С 24 часа.

4 этап

1.Учет всех результатов.

2.Выдача окончательного ответа.

Культуру идентифицируют как Y.pestis, если она на СПА образует характерные колонии, растет в виде нежных хлопьев в бульоне, лизируется чумным бактериофагом при t 22˚С, у зараженных лабораторных животных вызывает типичные патологоанатомические изменения.

PS.Используют серологический метод (ИФА) также как и РИФ – ускоренный метод диагностики.

Лечение.

Больные чумой срочно изолируются и госпитализируются.

В стационаре персонал (предварительно привитой) работает в противочумном костюме, строго соблюдая противоэпидемический режим.

Для лечения больных применяют:

1)антибиотики (стрептомицин, тетрациклин, рифампицин);

2)серотерапию – противочумную антитоксическую сыворотку (50-100 мл в/вено) или специфический иммуноглобулин;

3)чумной бактериофаг (от 2 до 100 мл pro dosi в/мышечно или внутрибубонно)

Профилактика

Специфическую профилактику проводят по эпидемическим показаниям: в случае появления больных чумой или в отношении лиц, проживающих в природных очагах чумы.

Применяют живую чумную вакцину из аттенуированного штамма EV, которую можно вводить накожно, подкожно (безыгольная инъекция), перронально и аэрозольно.

Основными являются предупредительные мероприятия, предотвращающие занос инфекции из-за рубежа и возникновение заболеваний в эндемических по чуме очагах. Для этого существует система мер, регламентированных международными и республиканскими правилами и требованиями.

ФРАНЦИСЕЛЛЫ ТУЛЯРЕМИИ

Возбудитель туляремии – Francisella tularensis открыт в 1911 г. Г. Мак-Коем и Х. Чепином в районе Туляре (Калифорния) и более подробно изучен Э.Френсисом. Семейство не определено.

Таксономия.

Fr.tularensis относится к отделуGracilicutes, роду Fruncisella.

Морфология.

Возбудитель представляет собой очень мелкие полиморфные неподвижные аспорогенные коккобактерии или палочковидные клетки, размером 0,2-0,7 мкм. В организме животных иногда образуют нежную капсулу. Могут иметь форму гирь, мелких кокков 0,1-0,2 мкм, проходящих через фильтры, крупных шаров, шаров с почковидными выростами, палочковидные и нитевидные формы до 8 мкм длиной. Хорошо окрашиваются всеми анилиновыми красками, только бледнее, чем другие микробы; грам-. В мазках из патологического материала, окрашенных по Романовскому-Гимзе, выявляется нежная капсула.

Культивирование.

Облигатные аэробы! На простых питательных средах не растут. Оптимальная t 37˚С, рН среды 6,7-7,4. Хорошо растет на свернутой яичной среде (Мак-Коя и Чепина) спустя 48-72 часа с момента высева и кровяно-цистеиновой среде на основе агара Д.

На этих средах образует S-формы колонии, т.е. круглые, с ровными краями, выпуклые, гладкие, мелкие, молочно-белого цвета

Первичные посевы материала выдерживают в термостате от 2 до 14 суток.

В жидких питательных средах туляремийный микроб размножается хуже и растет на поверхности среды в виде пленки; аналогичный рост дает на полужидкой желточной среде Дрожевкиной. Хорошо культивируется в желточном мешке куриного эмбриона.

Ферментативные свойства.

Ферментируют с образованием кислоты глюкозу и мальтозу, непостоянно – маннозу и левулезу; образует сероводород и не образует индол; не разжижает желатин.

Антигенные свойства и факторы патогенности.

Fr.tularensis содержит оболоченный Vi-антиген (поверхностный) и соматический О-антиген; обнаруживает антигенную близость к бруцеллам. Болезнетворные и иммуногенные свойства связаны с Vi-антигеном и эндотоксином. Вирулентные культуры в S-форме содержат Vi-антиген и О-антиген; культуры в R-формы содержат О-антиген, они авирулентны. Промежуточные S,R-формы содержат О-антиген и в несколько меньшем количестве Vi-антиген, из них готовят живую вакцину.

При длительном культивировании туляремийных бактерий на искусственных средах происходит переход всей культуры в R-форму.

Среди туляремийных бактерий выделяют 3 разновидности (3 эковара):

1)неарктическую (американскую);

2)среднеазиатскую;

3)голарктическую (европейскую).

Сероваров среди туляремийных бактерий не обнаружено.

Резистентность.

Возбудитель туляремии длительно сохраняется в окружающей среде, особенно при низкой температуре (8-10 месяцев); чувствителен к высоким температурам, кипячение убивает немедленно, нагревание до 60˚С вызывает гибель через 20 минут; под действием прямых солнечных лучей погибает через 20-30 мин. Бактерии туляремии не стойки к обычным дезинфектантам и ионизирующему излучению.

Патогенность для животных.

Возбудитель туляремии приспособился более, чем к 140 видам позвоночных и 100 видам членистоногих, способных передавать туляремийную инфекцию; но наибольшее эпидемиологическое значение имеют полевки, мыши, ондатры, зайцы, грызуны, а из переносчиков - слепни, клещи, комары, мокрицы. Туляремия - зоонозная болезнь.

Эпидемиология.

Туляремия распространена на многих континентах.

Источником инфекции являются все виды грызунов, чаще водяная полевка, ондатра, домовая мышь, заяц.

Передача возбудителя среди животных происходит чаще всего через кровососущих членистоногих: клещей, комаров, реже блох.

Заражение человека происходит трансмиссивным (при укусах инфицированными клещами, комарами, слепнями), контактно-бытовым (через поврежденную кожу или слизистую оболочку глаз), пищевым (при употреблении зараженной воды или пищевых продуктов), воздушным (при вдыхании с воздухом пыли или капелек, загрязненных выделениями грызунов) путями.

От человека человеку возбудитель туляремии не передаётся!!!

Патогенез.

В месте внедрения возбудителя развивается первичный очаг. Ведущее значение в патогенезе имеет распространение возбудителей по лимфатическим сосудам.

Возбудитель, его токсины, проникая в кровь, вызывают поражение лимфатических узлов (образование бубонов).

Клиническая картина.

Инкубационный период составляет 3-7 дней. Болезнь начинается внезапно, температура тела повышается до 38-49˚С, симптомы зависят в значительной степени от пути передачи инфекции и формы болезни.

Различают формы:

·бубонную;

·язвенно-бубонную;

·глазобубонную;

·ангинозно-бубонную;

·кишечную (абдоминальную);

·легочную;

·первично-септическую.

При каждой форме болезни наблюдается поражение лимфатических узлов.

По течению туляремия может быть острой, затяжной, рецидивирующей. Заболевание сопровождается развитием аллергии, которая сохраняется в течение многих лет, иногда всю жизнь.

В большинстве случаев заболевание заканчивается выздоровлением, однако, летальность может доходить до 5%.

Иммунитет.

Постинфекционный – стойкий и длительный, иногда пожизненный; развивается аллергизация к антигенам возбудителя.

Микробиологическая диагностика.

Возбудитель туляремии относится к группе особо опасных микроорганизмов, вследствие чего его выделение и идентификация могут производиться только в специальных лабораториях ООИ ЦГЭ и ОЗ, противочумных станций, научно-исследовательских институтов, подготовленным персоналом, привитым против туляремии.

Вследствие общности симптомов с чумой, сибирской язвой, брюшным и сыпным тифом, гриппом, малярией, бруцеллезом диагноз труден.

Решающая роль в диагностике туляремии принадлежит лабораторным исследованиям.

В зависимости от формы заболевания материалом для исследования являются пунктат из увеличенного лимфоузла, слизь из зева, отделяемое конъюктивы глаза, кожной язвы, мокрота или кровь, секционный материал (лимфоузлы, кусочки лёгких, селезёнки), а также почва, вода, ил, солома, кровососущие насекомые, пищевые продукты (путём проб).

Используют все 5 микробиологических методов, но основным является серологический метод, а аллергический метод используется для ранней диагностики.

У больных туляремией сенсибилизация наступает рано, уже на 3-4 день. Поэтому проводят постановку внутрикожной или накожной пробы с тулярином. Проба считается положительной, если отек и гиперемия не менее 5 мм вокруг или по ходу насечек (через 48-72 часа), или если инфильтрат диаметром не менее 5 мм. Проба положительна у переболевших и привитых.

Для серологической диагностики используют: РА, РПГА , РТГА, РИФ и ИФА, РСК.

Развернутую РА ставят по типу реакции Райта с разведениями сыворотки от 1:25 до 1:400 и туляремийным диагностикумом, разведенным в 5 раз ИХН.

Оба реагента берут в объеме 0,5 мл.

Результаты анализируют через 18-24 часа.

Условно-диагностический титр 1:100.

Такая концентрация Ат обычно накапливается к концу 2-ой недели, в последующем у больных титр Ат нарастает в 4-8 и более раз, в то время как у переболевших, как правило, остается неизменным. В низких титрах реакция может быть положительной у привитых и больных бруцеллезом.

РПГА ставят с эритроцитарным туляремийным диагностикумом, который добавляют по одной капле к разведениям сыворотки больного от 1:20 до 1:320 и более в объеме 0,5 мл. Условно-диагностический титр 1:100 при условии его нарастания в процессе болезни. РПГА становится положительной со 2-ой недели болезни.

РИФ - высоко специфична и чувствительна. Используют непрямой вариант. В качестве диагностикума берут взвесь вакцинного штамма в концентрации 500 млн/мл. Сыворотку разводят от 1:5 до 1:640. Диагностическим титром считают разведение 1:40 и выше, которое дает яркое свечение поверхности бактериальных клеток. Кроме больных положительная РИФ также регистрируется у переболевших и привитых.

Бактериологический метод в диагностике туляремии человека редко дает положительные результаты.

Культуру, как правило, выделяют после накопления ее на восприимчивых животных - биопроба и бактериологическое исследование:

1 этап

1.Для биопробы применяют белых мышей и морских свинок. Мышам материал вводят подкожно, морским свинкам - внутрибрюшинно. Животные погибают на 3-6 сутки, иногда позднее.

2 этап

1.Животных вскрывают, из органов делают мазки-отпечатки, окрашивают по Граму, дают предварительный ответ.

2.Из органов делают посев на свернутую желточную среду Мак-Коя и Чепина→ 37˚ С 10 дней (можно делать посев на желточно-агаровую среду.)

3 этап

1.Определяют характер роста на среде Мак-Коя и Чепина.

2.Делают мазок по Граму, проверяя однородность выделенной культуры.

3.Посев на «пестрый» ряд Гисса и бульон с 2 индикаторными

бумажками→37˚С 24 часа.

4.Посев на СПА→37˚С 24 часа (отсутствие роста).

5.РА с противотуляремийной сывороткой.

6.РИФ с чистой культурой.

7.Проба на чувствительность к антибиотикам на среде Мак-Коя и Чепина.

4 этап.

1.Учет результатов.

2.Выдача окончательного положительного ответа на основании морфологии возбудителя, отсутствия роста культуры на СПА, агглютинации гомологичной сывороткой, патогенности для белых мышей и морских свинок.

Лечение.

Применяют антибиотики и вакцинотерапию, используя убитую туляремийную вакцину.

Профилактика.

Специфическая профилактика проводится с живой туляремийной вакциной из штамма 15-й линии НИИЭТ. Ревакцинируют привитых через 5 лет. Профилактические меры сводятся к борьбе с грызунами, защите водоисточников, санитарно-просветительной работе.

Для создания активного иммунитета по эпидемиологическим показаниям применяют эффективную живую туляремийную вакцину, полученную из штамма №15 отечественными учеными Н.А. Гайским и Б.Я.Эльбертом.