Лекция Тема: «Семейства пикорновирусов, флавивирусов и рабдовирусов».

Лекция

Тема: «Семейства пикорновирусов, флавивирусов и рабдовирусов».

ПЛАН

1.Рабдовирусы. Вирус бешенства. Ультраструктура вируса бешенства и методы его культивирования. Эпидемиология и патогенез бешенства. Диагностика и профилактика.

2. Флавивирусы. Строение вируса клещевого энцефалита,

субтипы вируса. Эпидемиология, клинические формы

клещевого энцефалита. Методыдиагностика и

профилактика.

3. Семейство пикорновирусов. Вирус полиомиелита, его

ультраструктура и методы культивирования.

Эпидемиология и патогенез, иммунитет и профилактика

полиомиелита.

Семейство рабдовирусов

Таксономия

ЦарствоVira, подцарство РНК-содержащие вирусы, семейство Rhabdoviridae, объединяющее 2 рода: род Lissavirus, который включает вид — вирус бешенства и род Vesiculovirus, который включает вид— вирус везикулярного стоматита.

Вирус бешенства

Таксономия.

РНК-содержащий, семейство Rhabdoviridae(rhabdos – прут, т.е. имеющие вид палочки), род Lissavirus, вид вирус бешенства (lissa).

Ультраструктура.

Вирион пулевидной формы, размером 170 х 70 нм, имеет сложное строение: Нуклеоид представлен однонитчатой спиральной РНК, окруженной капсидом, имеет суперкапсид с шиповидными образованиями (состоит из гликопротеинов).

Биологические особенности лиссавирусов.

Резистентность. Лиссавирусы чувствительны к эфиру, хлороформу, этиловому спирту, хлорамину, лизолу, йодистым препаратам и повышенной температуре. Устойчивы к низкой температуре (при – 70^оС сохраняются несколько лет).

Культивирование. Вирус бешенства культивируются в мозговой ткани белых мышей, сирийских хомяков, кроликов, крыс, морских свинок, овец и др. Репродуцируется вирус в культурах клеток почек новорожденных хомяков и диплоидных клеток человека. Хорошо культивируется в куриных эмбрионах.

ЦПД. В цитоплазме пораженных вирусом клеток головного мозга животных или культуре клеток образуются специфические включения, впервые описанные В.Бабешем (1892) и А.Негри (1903) и поэтому названные тельцами Бабеша-Негри. Это – включения сферической или овальной формы, величиной от 0,5 до 20 мкм, хорошо окрашиваются кислыми красителями, содержат вирусный антиген, имеют диагностическое значение. Антигенная структура.

Содержит сердцевидные (группоспецифические)антигены и поверхностные (оболочечные, типоспецифические) антигены.

Не имеет антигенных разновидностей. Существует 2 вируса бешенства, идентичных по антигенным свойствам:

- дикий, циркулирующий среди животных, патогенный для человека, названный «уличным вирусом»;

- «фиксированный вирус» (virus fixe), полученный Луи Пастером в лабораторных условиях путем длительных пассажей уличного вируса через мозг кроликов (133 пассажа), который был им использован в качестве антирабической вакцины.

Эпидемиология и патогенезбешенства.

Бешенство – Rabies, Lyssa, Hydrophobia(водобоязнь)– остро протекающее, особо опасное инфекционное заболевание человека и теплокровных животных, характеризующееся тяжелым поражением центральной нервной системы, приводящим к летальному исходу. Это типичная зоонозная болезнь.

Циркуляцию вируса в природе обеспечивают енотовидные собаки, лисицы, волки, шакалы, куницы, хорьки, барсуки, крысы, мышевидные грызуны, а из домашних животных – кошки и собаки.

Природные очаги бешенства имеются повсеместно. Циркулирующие в различных районах мира варианты вирусов бешенства по биологическим и антигенным свойствам, типу репродукции более или менее однородны, но различаются по степени патогенности, межорганной диссеминации в зараженном организме и способности к формированию внутриклеточных включений. Вирус бешенства накапливается и выделяется через слюнные железы животного во время последних дней инкубационного периода болезни. Роль больного человека как источника инфекции минимальна, хотя слюна его и содержит вирус бешенства. Имеются единичные случаи заражения человека человеком.

Вирус бешенства обладает нейротропным действием.

Пути передачи:

·через укус;

·ослюнения кожи (имеющей повреждение);

·воздушно-пылевой.

Входные ворота: рана (от укуса) или поврежденная кожа, откуда по эндо- и периневрическим пространствам попадает в ЦНС, где размножается и центробежно поражает всю нервную систему (головной и спинной мозг), попадает в слюнные железы и выделяется со слюной.

Инкубационный период составляет 30-90 дней, но может варьировать от 10 дней до 1 года.

Периоды течения заболевания:

1.продромальный: страх, беспокойство, раздражительность, бессонница, воспаление на месте укуса (или ослюнения);

2.возбуждения: пароксизм (приступ) бешенства развивается внезапно и проявляется вздрагиванием всего тела, судорогами и спазмом глотательных и дыхательных мышц, слюноотделением, агрессией, развивается гидрофобия (водобоязнь), аэрофобия, фотофобия, акустикофобия;

3.паралитический:: возбуждение проходит, параличи мышц лица, конечностей, дыхательной мускулатуры, а спустя 1-3 дня внезапно наступает смерть.

Продолжительность заболевания – 3-7 дней, летальность 100%.

Постинфекционный иммунитет не изучен, естественный иммунитет

отсутствует.

Поствакцинальный иммунитет – формируется через 2 недели и сохраняется 1 год.

Лабораторная диагностика.

Лабораторная диагностика проводится посмертно.

Интравидальные методы диагностики:

1. РИФ для выявления внутриклеточных включений и антигенов лиссавируса у людей и животных (собак).

2. ПЦР – используют с той же целью, что и РИФ.

3. При отрицательных результатах вирусоскопии ставят биопробу: молодым мышам вводят субдурально эмульсию мозга или слюну павших от бешенства животных.

4. Серодиагностика.Для обнаружения специфических антител в сыворотке крови больных используют РН, РИФ, ИФА, ПЦР. Самой удобной является РН на мышах; эту же реакцию применяют для оценки уровня иммунитета у привитых антирабическими вакцинами.

Средства специфической профилактики бешенства:

· инактивированная культуральная антирабическая вакцина из производственного фиксированного вируса бешенства Внуково-32, выращенного на первичной культурк клеток почек сирийского хомяка;

· инактивированная антирабическая вакцина типа Ферми;

· антирабический иммуноглобулин.

Семейство флавивирусов

Таксономия

ЦарствоVira,подцарство РНК-содержащие вирусы, семейство Flaviviridae, род Flavivirus, который включает 5 видов: Ixodes Persulcatus (дальневосточный), Ixodes Ricinus (западно-европейский) - вирус клещевого энцефалита, вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки Денге,

вирус японского энцефалита.

Вирус клещевого энцефалита

Таксономия.

РНК-содержащий, семейство Flaviviridae, род Flavivirus, вид Ixodes Ricinus.

Ультраструктура.

Вирион сферической формы, размером 35 х 50 нм. Нуклеокапсидпредставлен одноцепочечной РНК и тесно прилегающей к нему липопротеиновой оболочки с шипиками длиной 5 нм.

Биологические особенности флавивирусов.

Резистентность. Вирусы чувствительны к эфиру и органическим растворителям, инактивируется протеазами, разрушаются при кислых и резко щелочных рН, погибает при температуре 56⁰ – 60⁰С в течение 30- 60 мин.

Культивирование вирусов: клеточные структуры Hela, оболочки куриного эмбриона, в организме белых мышей.

ЦПД. Проявляется в цитоплазме первичных и перевиваемых клеток.

Антигенная структура.

Вирусы содержат нуклеокапсидный С - белок. Группо -и

видоспецифисеские антигены находятся во внешней оболочке и представлены гликопреином и чистым протеином.

Эпидемиология и патогенез клещевого энцефалита

Клещевой энцефалит – инфекционное заболевание, характеризующееся лихорадкой, интоксикацией, поражением ЦНС. После укусов человека инфицированными клещами возбудитель распространяется гематогенным и лимфогенным путями, проникая в ЦНС. Вирус поражает двигательные нейроны передних рогов шейного отдела спинного мозга, мозжечок и мягкую оболочку головного мозга. Источник инфекции клещевого энцефалита – иксодовый клещ. Период активности клещей: май-июнь (весенне-летний энцефалит). Пути передачи: 1) трансмиссивный – основной 80%, через укусы клещей; 2) алиментарный – при употреблении в пищу сырого молока козьего или коровьего.

Патогенез

Развитие болезни зависит от локализации места укуса и от проникновения вируса.

Клиника

Инкубационный период: от 7 – до 14 дней (зависит от инфицирующей дозы).

Заболевание развивается остро. У пациента наблюдается озноб, повышение температуры до 39-40⁰ С, головная боль, рвота. Температура держится от 2 до 10 дней. Клинические проявления: потеря сознания, синдром «свисшей головы», судороги, параличи. Нарушение функций сердечно – сосудистой системы, гепато - и спленомегалия. Тяжесть инфекционного заболевания определяется типом возбудителя. Осложнения: поражение двигательного аппарата.

Иммунитет: гуморальный типоспецифический.

Лабораторная диагностика.

Материал для исследования: ликвор, кровь, сыворотка крови.

Вирусы выделяют из крови больных и спинномозговой жидкости умерших. Выделение вируса определяют заражением мышей-сосунков с последующей идентификацией видовой принадлежности с помощьюРТГА, РСК и наборами иммунных сывороток. Для групповой идентификации используют политиповые сыворотки, полученные иммунизацией белых мышей тканевой суспензией, зараженной несколькими вирусами. Окончательную идентификацию определяют с помощью реакции нейтрализации.

Серодиагностика.При наличии парных сывороток, из которых одна взята в разгар болезни, диагностическое значение имеет четырехкратное увеличение титра антител в сыворотке, полученной через 2-3 недели.

Профилактика

Неспецифическая:

·спецодежда;

·применение инсектицидов;

·взаимо- и само-осмотры после выхода из леса;

·скашивание травы вдоль обочин и дорог;

·уничтожение клещей;

·кипячение молока;

Специфическая:

·инактивированные убитые вакцины;

·противоклещевой специфический иммуноглобулин.

Первая помощь:

·сделать петельку, захватить ту часть, которая находится на поверхности, раскачать, вытащить, обработать поверхность антисептиком.

Лечение: интерферон, иммуноглобулин.

Семейство пикорновирусов

Таксономия

Царство Vira, подцарство РНК-содержащие вирусы, семейство Picornaviridae,

имеет 5 родов: Enterovirus, Hepatovirus, Rinovirus, Cardiovirus и Aphthovirus. Род Enterovirus насчитывает 72 серотипа: Poliovirus (рolios-сервй) – 1, 2, 3 серотипов, поражающий серое вещество передних рогов спинного мозга и вызывающий полиомиелит; Coxackievirus A – 24 серотипа; Coxackievirus В – 6 серотипов; ЕСНОvirus – 34 серотипа (Enteric cytopathogenic human orphans), являющиеся возбудителями полилмиелитоподобных заболеваний, ангин, миозитов; энтеровирусы серотипов 68,69,70,71, являющиеся возбудителями гастроэнтеритов.

Род Hepatovirus содержит вирус гепатита А, выделенный из энтеровирусов. где он фигурировал как 72-й серотип.

Род Rinovirus включает 113 серотипов, вызывающих ринит.

Кардиовирусы вызывают миокардиты, а афтовирусы - ящур у парнокопытных животных, вирус ящура имеет 7 серотипов.

Общая характеристика энтеровирусов.

1.Это РНКовые вирусы.
2.Имеют малые размеры 20-30 нм.
3.Небольшое число капсомеров, не окруженных какой-либо оболочкой.
4.Тип симметрии капсида – кубический.
5.Термоустойчивы.
6. Устойчивы к эфиру, к кислой среде, благодаря чему вирусы проходят

через желудок, устойчивы к желчи, пищеварительным сокам. Эпидемиологические особенности:а) естественная локализация - кишечник человека;
б) сновной путь распространения - фекально-оральный;
в) широкое распространение в природе.
г) преимущественная циркуляция в летне-осенний период времени.
д) широкое вирусоносительство у практически здоровых людей.
е) заболевание чаще встречается в детском возрасте; болеют чаще всего дети

6-12 лет; еще чаще дети первых 5 лет жизни.

Вирус полиомиелита

Ультраструктура.

Полиовирусы – это самые мелкие вирусы, имеющие простой вирион сферической формы, диаметром 20-30 нм, состоящий из линейной однонитчатой РНК и капсида, который состоит из 60 капсомеров, имеющих кубический тип, что придает капсиду форму икосаэндра (20-гранника).

Биологические свойства.

Полиовирусы не имеют суперкапсида, поэтому уних нет углеводов и липидов, вследствие чего они нечувствительны к эфиру, дезоксихолату, дезинфицирующим веществам.

Устойчивы к факторам окружающей среды, месяцами выживают в воде, почве, пищевых продуктах и на предметах обихода.

Чувствительны к действию УФ-лучей, высушиванию, к соляной кислоте, формалину, при 50^°С гибнут через 3 минуты, а при 100^°С – мгновенно.

Большинство энтеровирусов, за исключением вирусов Коксаки А и В, хорошо репродуцируются в первичных и перевиваемых клеточных культурах из тканей человека и обезъяны. Процесс репродукции вирусов происходит в цитоплазме клеток и сопровождается ЦПД в виде дегенерации клеток.

В культурах клеток под агаровым или бентонитовым покрытием энтеровирусы образуют бляшки (приблизительно через 7-10 дней диаметром 1 мм).

Антигенные свойства связаны с 4 видами капсидных белков. Они имеют общий для рода группоспецифический комплементсвязывающий Аг и типоспецифические Аг.

Эпидемиология, патогенез, клиника, иммунитет.

Пикорновирусы широко распространены в природе. Основными их резервуарами в окружающей среде являются фекалии и хозяйственно-бытовые сточные воды.

Вирус полилмиелита вызывает полиомиелит, или болезнь Гейне-Кожевникова-Медина.

Источником инфекции при всех пикорноэнтеровирусных инфекциях являются больной человек и вирусоноситель.

Механизм передачи инфекции – фекально-оральный и воздушно-капельный.

Входными воротами являются слизистые оболочки верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта. Первичная репродукция вируса происходит в лимфоузлах глоточного кольца и тонкого кишечника. Из лимфосистемы вирус попадает в кровь – вирусемия, а затем с током крови в ЦНС, где избирательно поражает серое вещество передних рогов спинного мозга (двигательные нейроны), в результате развиваются вялые атрофические парезы и параличи мышц ног, рук, туловища.

Инкубационный период – 7-14 дней.

Различают 3 клинические формы:

1) паралитическая(1%);

2) менингеальная (без параличей);

3) абортивная(легкая).

Иммунитет: естественный иммунитет сохраняется в течение 3-5 недель жизни ребенка; постинфекционный – пожизненный, но типоспецифический.

Лабораторная диагностика полиомиелита.

Материал:кровь, ликвор, испражнения, смывы из носоглотки, секционный материал (кусочки мозга, лимфоузлы).

Методы:

1. Вирусологический – заражают перевиваемые культуры клеток (RД – из рабдосаркомы человека, НЕр-2 – из карциномы, L20B, диплоидные клетки человека) исследуемым материалом. О репродукции вируса судят по ЦПД (дегенерация клеток), а идентифицируют вид вируса в РН на той же культуре клеток, в которой его получили.

2. Серодиагностика - проводится в первые дни заболевания (вирусемия) и спустя 2-4 недели после начала заболевания. Ставят РН, РСК или РТГА с парными сыворотками. Достоверность диагноза подтверждается 4-кратным нарастанием титра антител во второй сыворотке.

3. ПЦР – полимеразная цепная реакция позволила проводить точную диагностику полиомиелита.

Специфическая профилактика и лечение.

· Живая ослабленная полиомиелитная вакцина Сейбина (смесь трех типов полиовируса) – выпускается в виде жидкого препарата и в виде драже, принимается per os.

·Инактивированная трехвалентная полиомиелитная вакцина Солка, для внутримышечного или подкожного введения.

·Человеческий иммуноглобулин– для пассивной профилактики полиомиелита.

Специфических средств лечения энтеровирусных инфекций нет.