Лекция

Тема: «РНК-содержащие вирусы.Семейства ортомиксовирусов и парамиксовирусов».

ПЛАН

1. Семейство ортомиксовирусов. Особенности вирусовгриппа А,В,С.

Ультраструктура вирусов, антигенная вариабельность.

Эпидемиология, патогенез гриппа. Иммунитет и профилактика.

2.Семейство парамиксовирусов. Вирусы парагриппа, эпидемического паротита, кори, респираторно- синтициальный вирус, их ультраструктура, роль в патологии. Методы диагностики.

Семейство ортомиксовирусов.

Таксономия вирусов гриппа.

К семейству Orthomyxoviridae (группа РНК-содержащих вирусов) относятся вирусы гриппа человека, животных и птиц. Эти вирусы обладают сродством к мукоидным рецепторам клетки, отсюда название семейства (myxomatosus – слизистый).

Семейство ортомиксовирусов включает 3 типа вирусов гриппа двух одноименных родов: род Influenzavirus включает вирусы гриппа типов А и В и род Influenza – вирус гриппа тип С.

Вирус гриппа А был открыт в 1933 году У. Смитом, К. Эндрюсом и П. Лейдлоу; вирус гриппа В - в 1940 году Т. Френсисом и Т. Меджиллом, а вирус гриппа С- в 1947 году Р. Тейлором.

Ультраструктура.

Все 3 типа вирусов гриппа – сложные вирионы, имеющие сферическую форму, диаметром 80-120 нм. Нуклеоид представлен однонитчатой линейкой РНК, окружен капсидом. Нуклеоид имеет спиральный тип симметрии. Имеет суперкапсид с шипами, в состав внешней оболочки входят белки, липиды и полисахариды.

Биологические свойства.

Культивируют вирусы гриппа:

·в амниотической и аллантоисной оболочках куриного эмбриона;

·в первично трипсинизированных культурах почечных клеток обезьян, эмбриона человека и телят. Через 48-72 часа вызывают ЦПД в виде накопления вакуолизированных клеток, которые затем дегенерируют или отделяются от стекла. Некоторые штаммы вирусов гриппа способны образовывать бляшки;

·реже в организме хорьков, белых мышей, сирийских хомяков (после интраназального заражения у животных развивается гриппозная пневмония).

Резистентность: вирусы гриппа в воздухе сохраняют инфекционные свойства в течение нескольких часов, чем выше t^о и влажность, тем быстрее происходит инактивация вируса. Чувствительны к УФО, дезинфицирующим растворам, при t^о 50-60^оС погибают через несколько минут. Длительно сохраняется в заморо-женном состоянии и в глицерине.

Антигенные свойства.

Вирусы гриппа содержат внутренние сердцевидные типоспецифические S-антигены, по которым они и подразделяются на типы А, В, С. Вирусы типов А, В и С не имеют родственных антигенов, и между ними невозможна генетическая рекомбинация, поэтому их относят к разным видам. И есть поверхностные (оболочечные) V- антигены, состоящие из 2-х антигенов: гемагглютинина (Н) и нейраминидазы (N) и углеводного компонента.

S-антиген отличается высокой стабильностью; является общим для определенного типа вируса, неинфекционный и неиммуногенный, выявляется в РСК. V- антиген весьма изменчив. В настоящее время описано около полутора десятков гемагглютининов и нейраминидаз. В зависимости от их комбинации вирус гриппа А имеет 4 подтипа: HON1,H1N1, H2N2, H3N2, которые в разные годы вызывали тяжелые эпидемии гриппа. Каждые 10-15 лет в результате генетических рекомбинаций между вирусом человека и вирусами животных и птиц происходят значительные антигенные сдвиги и появляются новые подтипы.

Эпидемиология, патогенез гриппа, иммунитет.

Грипп – острая инфекция дыхательных путей, периодически приобретающая эпидемический характер. Восприимчивость высокая (наиболее восприимчивы к гриппу старики и дети), особенно зимой.

Вирус гриппа тип А поражает человека и животных, вызывая интенсивные эпидемии. Вирусы типа В и С поражают человека, тип В вызывает небольшие эпидемические вспышки, а тип С – редкие спорадические заболевания.

В 1918 г. тип А (H1N1) вызвал пандемию «испанки», которая унесла жизни более 20 млн человек. Тип А (H1N1) циркулирует с 1977 г. по настоящее время, тип H3N1 циркулирует с 1968 г. по настоящее время.

Сейчас представляют опасность штаммы вируса гриппа H5N1, который вызывает птичий грипп, и H1N1 – вызывает грипп свиней.

Эпидемическая ситуация по птичьему и свиному гриппу в мире остается напряженной, отмечены случаи со смертельным исходом.

Источник инфекции – больной человек, больное животное.

Путь передачи – воздушно-капельный.

Патогенез: Заражение вирусом гриппа происходит через носоглотку, в которой вирус присутствует в течение 5-7 дней (в некоторых случаях около 15 дней до начала заболевания и столько же времени после появления первых симптомов болезни). Вирус внедряется в эпителиальные клетки слизистой оболочки верхних дыхательных путей, затем попадает в кровь – вирусенемия, с током крови разносится по всему организму, поражая различные органы и развитие общетоксического синдрома.

Инкубационный период длится 1-2 суток. Общие симптомы: лихорадка, озноб, головная боль, ломота в теле, разбитость. Затем присоединяются кашель и насморк. Грипп без осложнений длится 5-6 дней. Тяжесть заболевания обусловлена осложнениями: пневмония, отек легких, поражение ЦНС, миокардит Абрамова-Финдлера и др.

Иммунитет: постинфекционный носит видоспецифический характер и продолжается от 1-2 (А-вирус), до 3-5 лет (В-вирус) или пожизненно (С-вирус). Перекрестный иммунитет к подтипам А-вируса не развивается.

Лабораторная диагностика.

Материал: мазки-отпечатки со слизистой оболочки носовой полости, отделяемое носоглотки, секционный материал (кусочки легкого).

Методы диагностики:

1. Экспресс-диагностика – выявление вирусного Аг с помощью РИФ в мазках-отпечатках (зеленовато-желтое свечение).

2. Серологический – РСК, РТГА, ИФА, РП в геле, РН – кровь берут в первые дни заболевания и в период выздоровления. У переболевших титр Ig увеличивается в 4 раза и более.

3. Вирусологический:

a)носоглоточными смывами заражают 9-14 дневные куриные эмбрионы, культивируют при 33^оС. Через 3-4 дня ставят РГА, добавляя к амниотической и аллантоисной жидкости эмбрионов эритроциты кур, морских свинок или О-группы крови человека. Вид вируса определяют с помощью РТГА, РН, РСК;

б) носоглоточными смывами заражают культуру клеток и через 3-4 дня ставят реакцию гемадсорбции для обнаружения вируса. Идентификацию вируса проводят поэтапно: тип определяют с помощью РСК, а подтип – с помощью РТГА и РН.

4. Риноцитоскопия мазков-отпечатков, обработанных флюоресцирующими типоспецифическими антигриппозными сыворотками, и окрашенных по Романовскому-Гимзе. Микроскопируют и обнаруживают вирусные включения, которые в мазках, обработанных флюорохроном, становятся огненно-красными, а окрашенных по Романовскому-Гимзе – сине-фиолетовыми.

Лечение и профилактика гриппа.

Средства специфической терапии:

·противогриппозный донорский иммуноглобулин;

·противогриппозная сыворотка;

·лейкоцитарный интерферон;

·ремантадин, адапромин, дейтифорин, виразол, арпетол (противовирусные препараты);

·иммуномодулирующие препараты: дибазол, продигиозан, курантил (дипиридамол);

·антибиотики применяют только при осложнениях.

Средства специфической профилактики:

·живая очищенная и концентрированная цельновирионная гриппозная вакцина (содержит по 20 мкг вируса гриппа А двух подтипов H1N1 и H3N2 и 26 мкг вируса типа В), она применяется подкожно однократно по 0,5 ил или двукратно – интраназально, по 0,25 мл в каждый носовой ход с интервалом 21-28 дней;

·трехвалентная полимер-субъединичная вакцина Гриппол, содержащая поверхностные антигены вируса гриппа трех типов с иммуностимуляторомполиоксидонием. Вводят однократно подкожно по 0,5 мл детям с 3 лет и взрослым;

·инактивированная формолвакцина французской фирмы «Пастер-Мерье» Ваксигрип, содержащей вирус гриппа трех штаммов. Ею вакцинируют лица, старше 65 лет, взрослых и детей с хроническими заболеваниями. Вводят подкожно или внутримышечно 0,5 мл;

·ограниченно профилактика гриппа проводится ремантадином, арбидолом, оксолином, интерфероном, иммуноглобулином, курантилом.

·

Семейство парамиксовирусов.

Таксономия: Царство Vira, РНК – содержащие вирусы, семейство Paramyxoviridae, которое объединяет 4 рода: род Paramyxovirus включает вирусы парагриппа 1-го и 3-го типов, род Rubulavirus – вирус эпидемического паротита и вирусы парагриппа 2-го и 4-го типов, род Morbillivirus – вирус кори и род Pneumovirus – респираторно-синцитиальные вирусы.

Вирусы парагриппа.

Вирусы парагриппа впервые выделены в 1956 г.

Ультраструктура: вирион округлой формы, диаметром 100-300 нм, Нуклеоид представлен РНК, окруженной капсидом, есть суперкапсид с шипиками.

Биологические свойства: вирус очень нестойкий в окружающей среде.

Хорошо репродуцируется в культуре клеток (почек обезьян или плода человека, на перевиваемых клетках Hela, Hep^-2), вызывая ЦПД: слияние клеток, образование многоядерных клеток, называемых симпластами или синцитием, а также феномен гемадсорбции.

В естественных условиях вирусы парагриппа непатогенны для животных.

Клиника и эпидемиология заболевания.

Источники инфекции – больные дети.

Путь передачи – воздушно-капельный.

Парагриппозные вирусы вызывают спорадические заболевания или эпидемические вспышки преимущественно среди детей младшего возраста. Заболевание характеризуется поражением слизистых оболочек верхних дыхательных путей, чаще гортани. Тяжесть течения болезни определяется типом вируса. Легкую форму парагриппа (першение в горле, охриплость, кашель) вызывает типы 1 и 2, тяжелую со стенозом гортани – тип 3, тяжелейшую с глубокой интоксикацией – тип 4.

Иммунитет: непродолжительный, типоспецифический.

Лабораторная диагностика:

1.Экспресс-диагностика парагриппа проводится при помощи РИФ (мазки делают из отделяемого зева и слизи нижней носовой раковины, обрабатывают мечеными Ат против вирусов парагриппа).

2.Вирусологический метод– выделение вирусов из отделяемого носоглотки в культурах клеток, а идентификацию проводят с помощью РН, РИФ, РТГА, РСК.

3.Серологический метод- РН, РИФ, РТГА, РСК в парных сыворотках, взятых с интервалом 3-4 недели, в динамике отмечается увеличение титра антител.

Специфическая профилактика и терапия парагриппа не разработаны.

Вирус эпидемического паротита.

Выделен в 1934г. (К.Джонсон и Э.Гудпасчур).

Ультраструктура: сложный вирион куполообразной неправильной формы, диаметром 150-175 нм, Нуклеоид представлен РНК, имеет капсид и суперкапсид с шипиками.

Биологические свойства.

Вирус инактивируется УФЛ, 50% спиртом и эфиром, 0,1% формалином, 1% лизолом, при 55-60^о погибает через 20 минут. Хорошо переносит низкие t⁰.

Культивируется в куриных эмбрионах, в первичных человеческих эмбриональных и почечных культурах клеток. ЦПД характеризуется образованием многоядерных клеток.

Известен один антигенный тип вируса.

Клиника и эпидемиология.

В естественных условиях животные не болеют эпидемическим паротитом, в эксперименте удается воспроизвести заболевание у обезьян.

Эпидемический паротит распространен повсеместно, чаще болеют дети 3-15 лет, но могут болеть и взрослые. Восприимчивость 100%. Эпидемические вспышки чаще бывают зимой и весной.

Источник инфекции – больной человек, вирус выделяется со слюной, механизм передачи – аэрозольный. Путь передачи – воздушно-капельный. Входные ворота – слизистые оболочки верхних дыхательных путей, конъюктива глаза; затем вирус попадает в кровь и разносится по организму. Вирус обладает тропизмом к железистым органам и нервной ткани.

Инкубационный период 8-21 день, заболевание длится 7-10 дней.

При эпидемическом паротите развивается лихорадка, опухают околоушные слюнные железы, а также подъязычные и подчелюстные. Голова ребенка похожа на голову поросенка, поэтому заболевание называют «свинка». Это очень контагиозная болезнь. У 50% паротит может протекать бессимптомно.

Опасен своими осложнениями: орхиты (у взрослых и подростков), реже поражаются яичники, развиваются полиневриты, нарушение слуха и зрения. Дети первые 6 месяцев не болеют эпидемическим паротитом.

Постинфекционный иммунитет: стойкий, пожизненный.

Лабораторная диагностика.

Материалом для исследования служат: слюна, отделяемое носоглотки, моча и ликвор.

1.Вирусологический метод– выделяют вирус из слюны, мочи путем заражения культуры клеток или куриных эмбрионов, а идентифицируют с помощью РТГА, РИФ, РСК, РН.

2.Серодиагностика: РТГА и РСК в парных сыворотках.

Лечение симптоматическое.

Средства специфической профилактики:

·живая культуральная паротитная вакцина;

·вакцина Тримовакс (против кори, эпидемического паротита и краснухи).

Вирус кори

Вирус кори выделен в 1954 г.

Ультраструктура: вирион сферической формы, диаметром 120-250 нм. Нуклеоид представлен РНК, окруженный капсидом. Нуклеокапсид имеет спиральный тип симметрии. Имеет суперкапсид с шипиками.

Биологические свойства.

Вирус кори вне организма сохраняется не более 30 минут, очень чувствителен к солнечному свету (в очаге не проводят дезинфекцию). Культивируется на однослойных культурах почечного эпителия человека, обезьян, собак, на культуре клеток амниона человека. ЦПД проявляется образованием многоядерных клеток и эозинофильных включений в цитоплазме и ядре.

Клиника и эпидемиология кори.

Корь – острое высококонтагиозное заболевание, поражающее главным образом детей, характеризующееся лихорадкой, катаральными явлениями и сыпью.

Болеет только человек!

Источник инфекции –больной с 1^огодня продромы и до 4-5 дня после высыпания, т.е. заразен в течение 8-10 суток.

Пути передачи –воздушно-капельный.

Корь начинается с лихорадки и катара верхних дыхательных путей, позже появляется обильная пятнисто-папулезная кожная сыпь. Вирус проникает через верхние дыхательные пути, затем попадает в кровь (вирусемия)и с током крови разносится по организму, поражая различные ткани. Корь опасна своими осложнениями: пневмония, энцефалит. От больной беременной женщины вирус может передаваться через плаценту, вызывая уродства плода и мертворождаемость. Вирус подавляет Т-лимфоциты,ослабляя иммунитет.

Постинфекционный иммунитет: стойкий, пожизненный.

Лабораторная диагностика.

1) Экспресс-диагностика кори проводится с помощью РИФ: делают мазки из носоглоточных смывов и из осадка мочи для выявления коревых включений, которые обрабатывают мечеными антителами против вируса кори.

2) Вирусологическое исследование – материалом заражают культуру клеток, а идентификацию вируса проводят с помощью РСК, РН, РТГА.

3) Серодиагностика: аналогична серодиагностике парагриппа.

Специфическая терапия не разработана.

Средства специфической профилактики:

·живая коревая вакцина;

·вакцина Тримовакс (коревая вакцина + вакцина против эпидемического паротита + вакцина против краснухи);

·противокоревой иммуноглобулин.

Респираторно-синтициальный вирус.

Ультраструктура.

Вирионы РСВ характеризуются типичными для парамиксовирусов свойствами, но отличаются от них меньшими размерами (80-120 нм в диаметре), специфическим комплементсвязывающим антигеном и отсутствием гемагглютинина.

Биологические свойства.

РСВ чувствителен к замораживанию и оттаиванию, быстро инактивируется при комнатной температуре.

Репродуцируются в культурах перевиваемых клеток Нер-2 и КВ и культурах клеток почек обезьян, эмбриона человека. В культурах клеток вирус не образует гемагглютинина, не дает гемадсобции, но вызывает ЦПД в виде образования синцития - пластов из склеивающихся клеток, потерявших оболочку, и многоядерных гигантских клеток. Не культивируются в куриных эмбрионах. Лабораторные животные резистентны к РСВ.

Клиника и эпидемиология.

РСВ вызывает около половины случаев ОРВИ у маленьких детей.

РСВ является возбудителем бронхитов и пневмоний новорожденных. Может вызывать ВБИ.

Дети могут реинфицироваться РСВ, т.к. иммунитет, выработанный после первичного инфицирования, не предохраняет от заболеваний. Вирус передается через обслуживающий персонал детских учреждений, главным образом путем прямого контакта, но не воздушно-капельным путем. Вспышки – в зимне-весенний период.

Лабораторная диагностика.

Лабораторная диагностика проводится только по определенным показаниям. Вирус можно обнаружить в исследуемом материале при цитоскопическом исследовании мазков, обработанных соответствующими иммунофлюоресцирую-щими сыворотками.

Для серодиагностики используют РСК, РТГА, РН в культурах клеток. Реакции проводят с парными сыворотками. Выделение вирусов проводят на культурах клеток почек обезьян, эмбриона человека. Идентифицируют вирусы в РТГА, РСК, РПГА и РН в клеточной структуре.